Bactériophage

puits 1 et 2 est le double de celle des puits 3 et 4. Après coloration par le bromure d’ethidium**, l’image suivante est obtenue. * On rappelle qu’un cosmide est un vecteur artificiel constitué d'un plasmide auquel a été ajouté le site COS du bactériophage lambda. L'intérêt des cosmides réside dans le fait qu'ils permettent le clonage de fragments d'ADN de grande taille soit environ de 45kpb. ** Le bromure d'éthidium (BET) une molécule aromatique plane qui s'intercale entre les paires de bases

EXERCICE N°1 : On analysé deux échantillons d’ADN. Le premier échantillon (E1) est d’origine inconnue et a 30% de nucléotides à base de thymine et 10% de nucléotides à base de cytosine. Le deuxième échantillon (E2) est extrait à partir d’un bactériophage et a donné 32% d’Adénine et 18% de Guanine. Les résultats concernant les autres bases ont été égarés. 1) Sachant que le taux en Guanine représente le 1/3 de la somme en nucléotides à bases puriques, quelle est la composition en bases azotées du

première génération sont dérivés du plasmide pBR322. Actuellement, on utilise préférentiellement des vecteurs plasmidiques de seconde génération : le plasmide pUCIS et ses dérivés. Parmi les vecteurs viraux, un des plus classiques est celui du bactériophage M13. Insertion dans les vecteurs de clonage. Les principes fondamentaux des méthodes utilisées pour cloner des gènes sont les mêmes pour les différents types de vecteurs, bien que les détails techniques puissent être différents. Pour simplifier

constituent une alternative plus intéressante par rapport à d’autres procédés d’obtention des molécules. L’ADN (acide désoxyribonucléique, support de l’information génétique héréditaire) à cloner est celui du phage lambda. Le phage lambda est un bactériophage, c'est-à-dire un virus qui n’infecte que les bactéries (le phage lambda est un virus d’Escherichia coli). Il faut donc cliver des fragments d’ADN pour les insérer à un vecteur. Pour cela nous utilisons des enzymes de restriction qui sont des endonucléases

monocaténaire, apparaissant dans les virus sous deux aspects moléculaires complémentaires capable de s'hybrider in vitro. - le génome bicaténaire du virus de l'hépatite B est circulaire. - le génome de certains bactériophages, comme le phage X174, un phage filamenteux, est à la fois monocaténaire et circulaire. - le génome des papovaviridae , bicaténaire circulaire se présente sous deux formes : • une forme 1, super hélicoïdale torsadée

Les Virus Table des matières 1.Définition :...............................1 2.Caractéristiques :....................1 3.Constitution :...........................1 a)Matériel génétique :.....................1 b)Capside :......................................1 c)Autres :.........................................1 4.Plusieurs sortes de virus :.......2 a)Virus icosaédriques :....................2 b)Virus hélicoïdaux :........................2 c)Virus enveloppés :........................2 d)Virus complexes

B-L’hybridation permet le repérage d’une séquence d’ADN Digestion par enzyme de restriction ADN génomique extrait Fragments d’ADN Électrophorèse Séparation par taille Hybridation avec sonde sb marquée Choix température * Transfert sur membrane Par capillarité Dénaturation par NaOH Fixation Lavage autoradiographie b-les autres types d’hybridation Hybridation de colonies bactériennes Puces à ADN L’ARN peut aussi être hybridé : northern blot L’hybridation sur puce pour

propose d’évaluer le nombre de bactériophages contenus dans une solution donnée, de volume égal à 100 ml. Pour cela on prélève 5 ml de cette solution qu’on divise en 50 échantillons de 0,1 ml. Chaque échantillon sert à ensemencer une boîte de culture d’une bactérie connue. Après 48 heures de culture, 17 des boîtes ensemencées ne présentent pas de lyse c’est-à-dire que dans 17 cas l’échantillon ne contenait pas de bactériophage. En supposant que le nombre de bactériophages présents dans chaque échantillon

celle possédant non-seulement un plasmide, mais un plasmide ayant un fragment d'ADN inséré dans le site de clonage multiple. De chaque côté du site de clonage multiple on pourra aussi placer la séquence d'ADN utilisée comme promoteur par les bactériophages SP6, T3 et T7. In vitro, en présence des ribonucléotides triphosphates et de l'une ou l'autre de ces ARN polymérases, il sera possible de synthétiser de l'ARN à partir du fragment d'ADN inséré. ∴ Les enzymes de l'ADN recombinant En plus des endonucléases

transfert génétique au cours duquel une partie d'ADN d'une bactérie est introduit dans une bactérie réceptrice, puis intégré au chromosome. De nombreux caractères peuvent ainsi être acquis par transformation : résistance aux antibiotiques, aux bactériophages... La conjugaison permet à une bactérie de donner une copie d'une partie de son patrimoine génétique à la bactérie réceptive. Pour réaliser une conjugaison, les deux bactéries doivent disposer de pilis sexuels, qui échangent par les extrémités