Boîte de Petri

développement de leurs résistances Nous allons réaliser un antibiogramme qui est une technique de laboratoire permettant de tester la sensibilité d’une souche bactérienne face à des antibiotiques. Pour réaliser un antibiogramme, dans une boite de pétri, on place des pastilles imbibées d’antibiotique sur une souche bactérienne. La bactérie peut réagir à l’antibiotique de 3 façons différentes : Soit elle résiste à l’antibiotique, soit elle est sensible à l’antibiotique, soit elle développe une

pendant 4 semaine à une concentration viable pour la survie des cellules. Les deux lignées cellulaires se sont développés dans un milieu sélectif favorable à leurs croissances (DMEM). Tous les 2 ou 3 jours les cellules sont détachées du fond de la boite de pétri grâce à de la trypsine 1x, les cellules sont ensuite observées sous microscope inversé afin d’apprécier la places prises des cellules dans le chant microscopique appelé confluence. Une dilution est donc réaliser ou non suivant la confluence obtenue

stériles, de dimensions nomina- NOTE - La qualité des membranes filtrantes peut varier selon le type et même d’un lot à l’autre ; il est donc conseillé de vérifier la qualité selon I’ISO 7704. 7.10 Incubateur, réglable à 37 + 1 OC. 7.11 Boîtes de Petri. 1s0 6461/2-1986 FI 8 Échantillonnage Se référer à I’ISO 5667/2 et à I’ISO 8199 en ce qui concerne les techniques d’échantillonnage. 9 9.1 Mode opératoire Traitement des échantillons Se référer à I’ISO 5667/3 et à I’ISO 8199 en ce qui concerne

indirect (via une étape de culture) 2 méthodes: * Dénombrement sur boite de Pétri (CFU: Colony Forming Units) * Dénombrement MPN (Most Probable Number): méthode statistique (sera présenté en Microbiologie 2 (L3)) II-3-2) Numération des micro-organismes viables : Dénombrement sur boîte de Petri Méthode d étalement basée sur la capacité des µorganismes à former des colonies visibles sur des milieux solides (en boîte de Petri)) Comptage des colonies visibles. Nécessité de faire des dilutions de

attendus. C. Dénombrement par ensemencement en surface En prenant en compte la seule boîte de pétri comprenant un résultat entre 30 et 300 colonies et ayant la plus grande dilution, seule la boîte n°-1 rentre dans ces critères et elle contient 41 colonies. 41 x 101 x 10 = 4,1 x 103 UFC.mL-1 = 3,61 Log UFC.mL-1   D. Dénombrement par incorporation Par un raisonnement analogue au paragraphe précèdent, seule la boîte n°-1 rentre dans ces critères et contient 280 colonies. 280 x 101 x 1 = 2,8 x 103

se fissurer. - Si aucune fissure n’apparaît, le rouleau est réintégré à la boulette, qui est malaxée puis légèrement séchée. - Si les fissures apparaissent, prélever la partie centrale du rouleau et la placer dans une capsule ou une boîte de pétri de masse connue, la peser immédiatement pour déterminer sa teneur en eau. - Effectuer un deuxième essai sur une nouvelle boulette. [pic] Rouleau formé à la main et mesurant environ 3 mm de diamètre et 10 cm de long. [pic]

boîtes de Pétris, contenant le même nombre de bactéries, y rajouter une dose différente d’essence d’ail dans chaque boîte de Pétris. Ajouter 1mL d’essence d’ail dans la première boîte, ajouter 2mL d’essence d’ail dans la deuxième boîte de Pétris, ajouter 3mL d’essence d’ail dans la troisième boîte de Pétris, ajouter 4mL d’essence d’ail dans la quatrième boîte de Pétris, ajouter 5mL d’essence d’ail dans la cinquième boîte de Pétris, ajouter 6mL d’essence d’ail dans la sixième boîte de Pétris. Laisser

Sommaire : * INTRODUCTION * IDENTIFICATION DES BACTERIES (COLORATION DE GRAM, état frais)  * Réalisation d’une dilution (10 -5). * Réalisation d’un ensemencement d’un milieu. * Réalisation d’un dénombrement microbienne dans une boite de pétrie. * Examen macroscopique des Cultures. INTRODUCTION ORIGINE DES MICRO-ORGANISMES PRESENTS DANS UN ALIMENT : Les micro-organismes des aliments ont 3 origines possibles : -Ils préexistent dans la matière brute ou l’aliment avant toute manipulation

« Lactobacillus bulgaricus » et « Streptococcus thermophilus ». Pour ceci, on essaye de cultiver des colonies de bactéries dans des boîtes de pétri. Matériel : |Matériel chimique |Matériel physique |Matériel biologique | |Eau distillé |Boîtes de Petri avec milieu de culture |Yaourt | |Différents huiles essentiels |gélosé stérile

pas, le milieu de culture serait déjà contaminé d’avance, et les résultats de l’ensemencement plus valables. 2. Pourquoi faut-il stériliser les boîtes à Pétri /le tube à essai ? Avec la stérilisation, on élimine toutes sortes d’organismes non souhaités. Sans cette stérilisation, il y aurait déjà une contamination des boîtes à Pétri/tubes à essai, avant l’ensemencement et il serait impossible d’avoir un résultat pertinent par la suite. Le résultat serait même inutilisable, car on ne saurait