Coloration De Gram

est inhibée par les sels biliaires et le cristal violet ce qui nous permet de poser l’hypothèse qu’il s’agit d’une bactérie à Gram positif, de même dans le milieu MMC, nous déduisons qu’elle est citrate négative. Quant à la souche 5, nous obtenons des colonies dans les milieux LB et MC mais pas dans le milieu MMC, alors nous émettons l’hypothèse que cette souche est gram négatif et citrate négative. Pour toutes les 6 souches, nous avons obtenus des colonies dans le milieu LB, alors c’est avec

translucides pour les 2 souches -> suspicion Entérocoques. | * Attention : les entérocoques, comme les streptocoques, peuvent se développer sur ces 3 milieux. Techniques d’identification. * Matériel et methode * Réaliser une coloration de Gram (traiter les 2 souches) * Réaliser une recherche de la catalase (traiter les 2 souches) -> Déposer une goutte de H2O2 sur une lame et déposer la bactérie. * Réaliser un test de résistance à la chaleur: -> Ensemencer un bouillon

Coloration de Gram et observation au microscope de différentes bactéries But de la manipulation: Le but est d'apprendre à réaliser un frottis pour prélever des bactéries dans leur milieu afin de pouvoir les observer au microscope. Le but est également d'apprendre à réaliser des colorations afin de déterminer si les bactéries possèdent une paroi Gram + ou Gram -. Mode opératoire du frottis (excepté pour la préparation du 4 mars): -Travail en milieu stérile (autour de la flamme bleue

: Examen à l’état frais : L’observation microscopique, grandissement 40 et luminosité moyenne, nous montre des bactéries de forme bacillaire dotée de mouvement (flagelles). Examen avec coloration de Gram: Après coloration de gramme, on observe au microscope, grandissement 100 et forte luminosité, des bacilles gram – (colorés en rose). Ce qui corrèle avec le résultat précédemment obtenu. Isolement : A partir de l’échantillon, les bactéries sont ensemencés dans un milieu de culture normal non spécifique

allons effectuer une coloration de Gram, cette coloration différentielle est basée sur la paroi des bactéries qui peuvent avoir une couche de pectidoglycane mince ou épaisse. Si la bactérie possède une couche de pectidoglycanne épaisse elle va fixer le violet de gentiane-lugol et donc avoir une paroi colorée en violet elle est dite de Gram +. Par contre si elle possède une couche de pectidoglycanne mince elle va fixer la fuchsine elle sera donc colorée en rose elle est dite Gram -. Les manipulations

Bactériologie Milieux de culture Gélose CLED (Cystine Lactose Electrolyte Déficient) * Usage : Utilisé dans l'étude des bactéries contenues dans l'urine. C’est un milieu non sélectif, de nombreuses bactéries, tant Gram + que Gram -, pourront se développer. L’absence d’électrolytes (pas de NaCl) limite le phénomène d’envahissement par les Proteus. (Surtout utilisé en coproculture) * Composition et préparation : * peptone : 4 g * extrait de viande : 3 g * peptone pepsique

chainettes La coloration de gram Principe C'est une coloration qui permet de mettre en évidence les propriétés de la paroi bactérienne, et d'utiliser ces propriétés pour les distinguer et les classifier. Son avantage est de donner une information rapide sur les bactéries présentes dans un produit ou un milieu tant sur le type que sur la forme. Elle permet de distinguer les bactéries à Gram positif, dotées d'une simple paroi avec une grande quantité de peptidoglycane, des bactéries à Gram négatif, composées

facultatifs grâce aux colorations de Gram et des tests comme l'oxydase, l'ONPG, des milieux en tubes et des milieux gélosés sur boîte de pétri. Ces tests et techniques d'identification sont très présents dans le monde industriel dans de nombreux secteurs tels la pharmacie, la cosmétique, l'agro-alimentaire ou l'environnement. II – Résultats 1) Identification de cocci à Gram (+) Le test de coloration de Gram donne une coloration bleue pour le tube, le germe est donc bien Gram (+). Au microscope

réalisé la dernière partie du challenge test d’un savon liquide à J28. Observations microscopiques Nous réalisons une coloration de Gram pour les deux souches étudiés, à partir de la souche isolé sur gélose ordinaire. souche | J | forme | coque | taille, aspect | 1 µm, rond | gram | positif | souche | 10 | forme | bacille | taille, aspect | court, fin, droit | gram | négatif | Tests enzymatiques Pour la souche J, nous réalisons le test de la catalase Observation : apparition de

certaines bactéries : ce sont les éléments « inconstants » ou « facultatifs ». Construire avec eux et à partir du schéma précédent un tableau récapitulant les éléments constants et facultatifs : Eléments CONSTANTS Eléments FACULTATIFS Paroi (Gram+ : PG ; Gram- : mbr ext + PG) Capsule Membrane plasmique Mésosome (rôle incertain) cytoplasme Plasmide Périplasme (espace périplasmique) Vacuole à gaz (bactéries aquatiques) Ribosomes Inclusions de réserves Polysomes Pili = fimbriae Appareil