Coloration De Gram

2- Coloration de Gram : Au cours de cette coloration les bactéries sont traitées en premier temps par le violet de gentiane puis décolorer par l’éthanol et une deuxième coloration par de la fuchsine (après lavage). Les bactéries dont la paroi résiste à l’alcool restent colorées par le violet de gentiane et sont dite Gram (+), ceux dont la paroi est perméable à l’alcool perdent leur coloration par le violet de gentiane et se colorent en rouge par la fuchsine, ce sont les bactéries Gram (–).

Staphylococcus aureus Table des matières But de l’épreuve! Théorie! Gram Description macroscopique et microscopique Catalase Oxydase Mobilité Hémolyse O-F Mannitol KIA Macconkey Réduction des nitrates Méthyle rouge Antibiogramme Galerie API 20E 3 3 3 4 5 5 6 6 7 8 8 9 9 10 11 11 Procédure! Observations et résultats! Analyse! Description macroscopique et microscopique Gram Catalase Oxydase Mobilité Hémolyse O-F KIA Macconkey Mannitol

frottis – Séchage du frottis Réalisation d’un frottis – Fixation à l’alcool Réalisation d’un frottis – Flambage à l’alcool Coloration de GRAM – Coloration au violet de gentiane Coloration de GRAM – Mordançage au lugol Coloration de GRAM – Décoloration à l’alcool Coloration de GRAM – Coloration à fuchsine Coloration de GRAM – Séchage de la coloration V Manipulations : Premier jour 1) Prélèvement de microorganismes dans l’environnement : - Réalisez un prélèvement avec un

bactéries présentes dans le yaourt. Puis, dans une deuxième partie, nous observerons et nous déterminerons la concentration en levures d’une suspension. Enfin, dans un troisième temps, nous utiliserons différents tests biochimiques tel que la coloration de GRAM, la recherche d’activité catalase/oxydase, la recherche d’endospores bactériennes ou encore la détermination du type respiratoire, afin d’identifier les microorganismes présents sur des aliments contaminés. Pendant toute la durée de ce TP nous

travail 1- la préparation des milieux de culture pour le contrôle biologique des aliments ; (page 3) 2- recherche et dénombrement de micro-organismes (bactéries et champignons) ; (page 5) 3- isolement et identification des bactéries pathogènes (coloration de gram, tests d oxydase et de catalase, test sur galerie API) ; (page 8) 4- test de toxicité sur souris ; (page 12) 5- dosage des toxines protéiques (méthode de BRADFORD). (page 14) INTRODUCTION ORIGINE DES MICRO-ORGANISMES PRESENTS DANS UN ALIMENT

des selles après coloration de Gram : - évaluer le pourcentage de bactéries Gram + et Gram -; - rechercher les aspects caractéristiques (Campylobacter, Vibrio). Cet examen est très important et ne doit jamais être omis. Il permet de rechercher les leucocytes qui, en quantité supérieure à 5 par champ, sont le signe d'une diarrhée à germe invasif, de même que la présence d'hématies. Il permet de voir aussi si la flore est équilibrée entre bactéries à Gram positif et à Gram négatif (environ

réalisation de ce TP j’ai dû manipuler suivant les Bonnes pratiques de laboratoire comme appris suivant les séances précédentes. C'est-à-dire : * Manipuler sous conditions stériles. * Repiquer, transférer, isoler. * Réaliser une coloration de GRAM. * Couler un milieu de culture gélosé. Les mileux utilisés pour la réalisation de ce TP : 1. Hugh et Leivson. 2. Viande foi. 3. Mossel. 4. Colombien. 5. T.S.C. 6. Nous avions 2 souches différentes chacun pour

Hygiène 30 janvier 2014 Dr I. MARTIN Unité d’Hygiène Inter-Hospitalière CHU SE Plan Rappels • Infection et types d’agents pathogènes • Milieux ordinaires de vie des agents infectieux • Modes de transmission Bactéries : • • • • Structure et coloration de Gram Culture – antibiogramme - nomenclature Flores bactériennes Ultrastructure Antibiotiques et mécanismes d’action Résistances bactériennes, BMR voire BHR Infection Une infection est la pénétration puis le développement de micro-organismes dans

Gamma Proteobacteria Ordre Enterobacteriales Famille Enterobacteriaceae Genre Escherichia Nom binominal Escherichia coli T. Escherich, 1885 Escherichia coli, également appelée colibacille et abrégée en E. coli, est une bactérie intestinale (Gram négatif), des mammifères, très commune chez l'être humain. En effet, elle compose environ 80 % de notre flore intestinale aérobie. Découverte en 1885 par Theodor Escherich, dans des selles des chèvres, c'est un coliforme fécal généralement commensal

composant l’enveloppe de la cellule. On distingue les bactéries en deux groupes sur la base d’une technique de coloration : la coloration de Gram, technique mise en place en 1884 par Christian Gram. Les bactéries sont appelées « bactéries Gram+ », « bactéries à Gram positif », « bactéries Gram positives » pour les unes, et les autres « bactéries Gram- », « bactéries à Gram négatif », « bactéries Gram négatives. » Protocole : On fixe les bactéries sur une lame de verres. Puis, on les colore au violet