Électrophorèse sur gel de polyacrylamide

souche a été isolée sur milieu gélosé additionné de Tétracycline et d’Ampicilline. De ce milieu, les cellules d’E.coli ayant intégré le plasmide recombinant ont été sélectionnées par vérification de la présence de ce plasmide à l’aide d’une électrophorèse sur gel d’agarose (Cf. Image 1). Les pistes des colonies n° 1, 2 et 4 montrent la présence du plasmide par un spot de migration. Elles seront donc utilisées pour la surproduction de l’AAL et ensuite sa purification. II Surproduction de l’AAL et

io na 3.2 La séparation par électrophorèse des lipoprotéines sériques est réalisée pour un sujet après un repas riche en lipides (document 5). N L’électrophorèse est effectuée sur gel de polyacrylamide à pH 8,6 à 250V pendant une heure. Ba s e L’aspect des supports électrophorétiques 2 heures, 6 heures et 10 heures après la fin du repas est donné sur le document 5. La séparation des lipoprotéines par électrophorèse sur gel de polyacrylamide se fait selon la charge et la taille

(QSépharose)----------------------------------------------------------------- P17 II.1.D. Purification par chromatographie d’affinité (héparine sépharose)----------------------------------------------------------------- P19 2 II.2. Analyse par électrophorèse SDS-PAG --------- P21 II.3.Analyse par Western-Blot----------------------------- P27 IIIRésultats / Discussion------------------------------------ P30 III.1. Purification de l’OVAX à partir du blanc d’œuf--------------------------------------------------------------------

des années 1970. Sommaire  [masquer]  * 1 Relation avec les autres sciences biologiques « à l'échelle moléculaire » * 2 Techniques de biologie moléculaire * 2.1 Clonage d'expressions * 2.2 Réaction en chaîne par polymérase * 2.3 Électrophorèse * 2.4 Southern blot * 2.5 Northern blot * 2.6 Western blot * 2.7 Puce à ADN * 2.8 Technologie abandonnée * 2.9 Histoire * 3 Liste de quelques biologistes moléculaires connus * 4 Notes et références * 5 Voir

Intérêt de la PCR et conditions opératoires 3. Réactions enzymatiques : restriction et ligation 4. Electrophorèse en gel d’agarose a) Migration/Séparation b) Conditions opératoires c) Visualisation d) Purification III. Résultats et discussion 1. Gel 1 2. Gel 2 B. Transformation bactérienne I. principes 1. la chimiocompétence 2. l’électroperméabilisation

la réponse appropriée. Voir la section d’information sur les monographies générales (pages de garde) PHARMACOPÉE EUROPÉENNE 7.0 Érythropoïétine (solution concentrée d’) Limites : identifiez les pics dus aux isoformes 1 à 8 dans B. Electrophorèse capillaire de zone (2.2.47). l’électrophorégramme obtenu avec la solution à examiner, Solution à examiner. Diluez la préparation à examiner par comparaison avec l’électrophorégramme obtenu avec la avec de l’eau R de façon à obtenir une concentration

pression d’argon de 1,72.10” N/m2. Elle est centrifugée pour éliminer un léger précipité cette opéralion est durant la concentration; formé répétée deux fois et, à ce stade la pureté de la préparation est testée par électrophorèse sur gel de polyacrylamide traité au dodécyl sulfate de sodium (SDS). MESURE DE L'ACTIVITÉ NITRO~NASIQUE IN VITRO La réaction est effectuée dans des flacons à pénicilline de 10 ml fermés hermétiquement par des bouchons à jupe rabattable en «

entière les régions répétitives, non codantes, qu’on veut examiner : ces régions contiennent des successions de bases (A, C, G et T) caractéristiques de chaque individu. Les fragments d’ADN sont introduits à l’une des extrémités d’une plaque de gel. 5. Le gel ne manipule pas facilement. Les fragments sont donc transférés sur une membrane de nylon, sans altération de la séquence. Puis les deux bruns des fragments de la double hélice d’ADN sont séparés. 6. La membrane de nylon est mise dans une solution

est fixée sur bille de chitine • Électrophorèse de proteines en conditions dénaturantes : But : Séparer les proteines accrochées aux billes selon leur masse moléculaire afin de mieux visualiser l’interaction. Principe : On décroche le complexe protéines recombinantes – anticorps des billes grâce à du SDS (Sodium Dodécyl Sulfate) qui est présent dans le tampon de charge. Puis après dépôt dans les puits d’un gel de polyacrylamide on fait migrer ce complexe dans un champ électrique

1. Principe général et grandeurs fondamentales La séparation des composés par électrophorèse capillaire résulte de deux mécanismes de transport, l’électromigration et l’électroosmose. 1.1 Électromigration L’électromigration résulte du déplacement d’une espèce chargée lorsqu’elle est soumise à un champ électrique. La vitesse linéaire acquise (ou vitesse électrophorétique) est alors fonction du champ électrique et de la mobilité électrophorétique de l’ion selon la relation suivante : vep