Électrophorèse sur gel de polyacrylamide

* chromatographie sur colonne: La solution de protéines est versée au sommet d’une colonne qui joue un rôle de filtre en fonction des caractéristiques chimiques de ses constituants: - chromatographie de filtration sur gel: les petites molécules sont retardées par les mailles du gel tandis que les grosses passent rapidement. - chromatographie d’affinité: les protéines sont retenues par des ligands (ex anticorps ou substrat) puis sont éluées par un solvant de force ionique élevée. - chromatographie

la nucléase micrococcale (qui clive l’ADN double-brin) clive l’ADN entre certaines des particules décrites ci-dessus; apparemment, les particules empêchent l’ADN qui leur est associé étroitement d’être digéré par la nucléase. L’électrophorèse sur gel indique que chaque particule de n-mère contient ~200 n pb d’ADN. 5. Des expériences de liaisons croisées indiquent que les histones H3 et H4 s’associent pour former le tétramère (H3)2(H4)2. Ces observations ont conduit Kornberg à proposer que les

loin. La séparation est réalisée le plus souvent par chromatographie en colonne (soit d’échange ionique soit en phase inverse) et à un degré moindre par chromatographie sur couche mince, sur papier, par chromatographie en phase vapeur ou par électrophorèse (systèmes capillaires). 6.3. Ionisation, propriétés acido-basiques. Il s’agit d’une propriété essentielle qui conditionne le comportement des acides aminés en solution puis, par généralisation, celui des protéines surtout en fonction du pH

CHROMATOGRAPHIE D’EXCLUSION STÉRIQUE 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 Principe de la chromatographie d’exclusion stérique (CES) Phases stationnaires et phases mobiles Traitement du chromatogramme Instrumentation Domaines d’application EXERCICES CHAPITRE 8 • ÉLECTROPHORÈSE CAPILLAIRE ET ÉLECTROCHROMATOGRAPHIE 8.1 8.2 8.3 8.4 8.5 8.6 De l’électrophorèse de zone à l’électrophorèse capillaire Mobilité électrophorétique et flux électro-osmotique Instrumentation Techniques électrophorétiques Performances Électrochromatographie

laquelle l’ATP semble jouer un rôle important. 1- On purifie l’enzyme par une série d’étapes expérimentales. La protéine purifiée apparaît homogène par tamis moléculaire, la masse moléculaire ainsi fournie est de 164000 Da. En électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS et d’urée la protéine semble également homogène et la masse moléculaire apparente est de 80000 Da. Quelles hypothèses peut-on formuler sur la structure de E ? (6 points) 2- On réalise par la suite, en milieu

..................................................................... 95 3.3.1. Détermination du degré d’hydrolyse pour le suivi des protéolyses. ............................................................... 95 3.3.2. Réalisation d’un gel de polyacrylamide en conditions dénaturantes............................................................... 96 3.3.3. Suivi de l’activité polysaccharide hydrolase (dégradation des parois cellulaires). ......................................... 96 3.3.3.1. Suivi

l’infection VIH nécessite toujours de disposer des résultats concordants de deux prélèvements distincts (Yeni P, 2010). La méthode de référence est le Western blot où les protéines virales sont séparées, selon leur poids moléculaire, par électrophorèse sur gel de polyacrylamide avant d’être transférées sur une membrane de nitrocellulose (Gallagher S., Winston E., 2008). La présence d’anticorps contre une protéine donnée est révélée par une réaction immuno-enzymatique qui se matérialise par une bande colorée

comportent comme des polyanions et migrent vers l'anode lors d'une électrophorèse. L'électrophorèse est actuellement l'outil de base de la génétique moléculaire car elle permet de séparer des fragments d'acides nucléiques en fonction de leur taille. * remarque importante : Les molécules se déplacent dans un champ électrique uniquement parce qu'elles sont chargées mais la migration nécessite un support . Sur le plan électrique, ce support (un gel poreux) n'intervient pas, par contre, sa porosité va déterminer

RMN RT-PCR RU TCS TMG X-Gal Xt Magnésium millimolaire Manganèse spectrométrie de masse nanomolaire nicotinamide adénine dinucléotide nicotinamide adénine dinucléotide phosphate open reading frame / phase ouverte de lecture électrophorèse de protéines en gel de polyacrylamide dénaturant sérine sucre-phosphate phosphatase paire de base phosphoglycérate mutase phosphate inorganique PTS Regulation Domain phosphoénolpyruvate sucre phosphotransférase Ribonucleic Anti Terminator résonance magnétique nucléaire

de pKa 4°) Les 20 acides aminés protéinogènes a) Critères de classement b) Propriétés des chaînes latérales 5°) Techniques de séparation des acides aminés a) Chromatographie de partage b) Chromatographie sur résine échangeuse d'ions c) Electrophorèse sur acétate de cellulose II- LA STRUCTURE PRIMAIRE DES PROTEINES 1°) La liaison peptidique 2°) Le plan peptidique 3°) Diversité de séquences des protéines III- LA STRUCTURE SECONDAIRE DES PROTEINES 1°) L'hélice alpha 2°) Le brin béta 3°)