Élution

l'éluant ne doit pas atteindre la ligne de dépôt en début d'expérience. La feuille de papier doit être fixée dans l’encoche de la cuve pour éviter qu’elle ne tombe dans l’éluant. Observez la migration pendant 10 à 20 minutes sans bouger la cuve à élution : le solvant doit arriver à 2 cm du haut du papier Whatman environ. Noter rapidement au crayon de papier les positions du solvant (front du solvant). Séchez la feuille de papier Whatman rapidement au sèche-cheveux. ➢ Ecrire vos observations et

général donné aux espèces accompagnant les principes actifs dans un médicament Ce sont les excipients 2) Quels sont les composés chimiques présents dans le médicament analysé ? Expliquez Le médicament analysé laisse apparaître 2 taches après élution, donc il est constitué de 2 espèces qui sont le paracétamol et la caféine car elles se trouvent à la même hauteur que les références utilisées. 3) Déterminer la valeur du rapport frontal Rfa de l’aspirine de cette chromatographie. Rfa = 4) h 3,9

composition fixe la polarité. Cette phase progresse le long de la phase stationnaire. Après que l’échantillon ait été déposé sur la phase stationnaire, les substances migrent à une vitesse qui dépend de leur nature et de celle du solvant (ELUTION). La séparation des divers constituants au cours de l’élution s’appelle le DEVELOPPEMENT. Les différents produits ne sont, en général, pas immédiatement visibles. Il faut les révéler. De la même façon qu’en chromatographie

effet il est spécifique à un groupe de protéine. On récupère enfin l'enzyme après lavage par un tampon contenant du NADH, le ligand compétiteur, et de l'oxamate. L'oxamate se liera avec l'enzyme permettant ainsi de la libérer du gel au moyen d'une élution par compétition, car le NADH se fixera sur le ligand, on obtient alors l'extrait enzymatique ou essaie. On obtient Afin de contrôler l'activité enzymatique de l'extrait, on réalise une cinétique de celle-ci par spectrophotométrie. Le NADH sous sa

– Lycée Paul Cézanne – Aix en Provence © http://labotp.org 3) Vérification de la pureté de l'aspirine par chromatographie a) verre de montre ligne front de l'éluant bécher plaque CCM C AS S ligne de dépôt éluant C AS S Elution: les tâches sont invisibles • Sur la plaque, avec des piques, faire 2 dépôts: (vérifier les dépôts sous UV). C: solution dans l’éthanol d’aspirine contenue dans un comprimé AS : solution d’acide salicylique dans l’éthanol S: solution du produit

présentes au cours du temps - suivi par ccm proposé : * Avec nature des échantillons déposés sur la plaque et dates de dépôts  * description de la technique de dépôt des échantillons sur la plaque CCM * la mise en place de la plaque dans la cuve * élution jusqu’à 1 cm du bord supérieur * retrait de la plaque avec pince et repérage du front de l’éluant * révélation sous UV. Evaluation de la compétence S’APPROPRIER: (coef 1) rechercher, extraire et organiser l’information en lien avec une situation :

spectre UV donne deux pics à 240 et 285 nm. Chromatographie sur couche mince « CCM » : Isolement de la benzodiazépine soit par extraction par un solvant organique en milieu alcalin, soit par adsorption « sur charbon ou sur résine AMBERLITE » puis élution. : Migration ;, Révélation par hydrolyse acide suivie de diazotation. ou par  une lampe UV à 254 nm. Réaction colorée avec l’iodoplatinate  « réaction de DRAGGENDORF ». Fluorescence dans l’UV par addition d’acide phosphorique. Dosage

F2. 2) Obtention de F3 et de F4 F3 et F4 sont ensuite obtenus par chromatographie d'échange d'anions sur DEAE. Figure 2 : schéma d'une chromatographie d'échange d'anions sur DEAE. Les courbe d'élution de la DEAE : DO280nm = f(volume élution) sont donnée ci-après (graphiques 1 et 2). Cela permet de distinguer nettement les fractions F3 et F4 par changement de force ionique. Graphique 1 : Mesure de l'absorbance à 280nm des différentes fractions protéiques pour le tampon 1 Ces résultats

récipient préalablement taré, mettre à l'étuve (à 80°C) pendant 20 minutes environ. Peser. Prendre le point de fusion. Comparer au précédent. 3- CaractÉrisation du produit obtenu par chromatographie couche mince ( Préparation de la cuve à élution, environ une demi-heure avant utilisation. ( Dépôts des solutions Dans quatre tubes à essai, introduire 1 mL environ d’éther diéthylique et une pointe de spatule de : A : paracétamol pharmaceutique (déjà préparé) B : paracétamol brut 

échantillons à déposer. 3. Dépôt des échantillons • À l'aide d'une pointe fine, déposer les échantillons sur leurs marques respectives. La tache de dépôt ne doit pas dépasser 3 mm, et il faut changer de pique pour chaque échantillon. 4. Élution • Introduire la plaque verticalement dans la cuve : la ligne de dépôt doit être au-dessus du niveau du solvant. Boucher la cuve. • Le solvant contenu dans la cuve monte le long de la plaque : c'est l'étape d'élution. Attendre que l'éluant arrive