Élution

goutte suffisamment importante de l’espèce chimique à analyser. Les espèces chimiques recherchées sont incolores, il faut procéder après l’élution à leur révélation en les faisant réagir avec une solution de permanganate de potassium. ➢ Après élution, repérer le front de l’éluant au crayon de papier puis plonger la plaque dans une solution de permanganate de potassium (K+ + MnO4-). Exploitation a) l’arôme de vanille est-il plus soluble dans l’eau ou dans le dichlorométhane. Justifier

hyperimmunisé que l’on veut purifier par chromatographie. Pour cela on le passe dans une colonne d’affinité contenant de la BSA. Les anticorps contenus dans le sérum vont alors venir se fixer à la BSA. Pour récupérer les anticorps on fait alors une élution, 4 fractions de 1mL sont ainsi obtenues. - Acide/base Dans deux des puits de la première colonne sont ajoutées une solution basique (pH=11,5) et une solution acide (pH=3,5) , ces pH extrêmes vont jouer sur les interactions antigène / anticorps

Préparation COF TP 1 Atelier 1 Savoir-faire un schéma légendé d’un montage à reflux avec addition lente d’un réactif. A quoi sert un réfrigérant ? Il sert a refroidir et condenser les molécules. Soit pour récupérer un produit lors d’une distillation ou pour éviter la perte par évaporation pendant un chauffage à reflux A quoi sert un élévateur ? Il sert a élever ou placer a une hauteur donné du matériel de chimie Que se passe-t-il si on fait entrer l’eau par le haut du réfrigérant

la température d’ébullition Infusion La drogue est mise en contact avec le solvant à ébullition. On laisse refroidir la suspension Température d ’extraction La drogue est en contact avec le solvant à température ambiante Lixiviation, élution Le solvant passe à travers la charge de solide Percolation Le solvant coule sur et à travers la charge de solide Paramètres d’influence Nature MATIERE VEGETALE Nature Origine SOLVANT Concentration Partie Volume Teneurs

et homogénéisés • Mélange avec méthanol et eau, homogénéisation • Filtrage + lavage III. Méthode immunologique: ELISA IV. Comparaison des méthodes V. Méthode sélectionnée • Extraction en phase solide : colonne de silice greffée (apolaire), élution dichlorométhane • Produit d’élution évaporé sous azote • Re-dissolution dans la solution tampon, homogénéisation Analysis of thiabendazole and procymidone in fruits and vegetables by capillary electrophoresis–electrospray mass spectrometry 9 R

diamètre.  Elles doivent être peu étendues, mais très concentrées  Laissez sécher (refaite la manipulation si nécessaire)  Appeler le prof pour vérification Ligne de dépôt 1 0,5 1 cm 1,5 cm J R 1 0,5 V M Elution  Mettre la plaque à la verticale dans le bécher contenant l’éluant N°01 et laisser éluer. ATTENTION :  La ligne de dépôt ne doit pas tremper dans l'éluant.  Ne pas déplacer le récipient pendant l'élution. Questions a. Qu'observez-vous

et de l'acide oxamique : un analogue du pyruvate. L'acide oxamique créera avec l'enzyme une liaison covalente cette fois beaucoup plus forte que celle créée entre l'enzyme et le bleu de cibacron, permettant ainsi d'arracher du gel au moyen d'une élution par compétition, on obtient alors l'extrait enzymatique ou essaie. Afin de contrôler l'activité enzymatique de l'extrait, on réalise une cinétique de celle-ci par spectrophotométrie. La LDH catalysant la transformation du lactate en pyruvate (et

réticulation sur la surface interne de la colonne. On utilise ici une colonne de type PLOT. 5. Détecteur : Placés à l’extrémité des colonnes, les détecteurs décèlent la présence de substances dans le gaz vecteur au fur et à mesure de leur élution. FID : Chromatographe en Phase Gazeuse couplé à un Détecteur à Ionisation de Flamme Le détecteur à ionisation de flamme est un détecteur universel utilisé pour l’analyse de molécules organiques. On choisit ce détecteur car il sert principalement

GRANDEURS FONDAMENTALES Coefficient de distribution 1. Grandeurs de rétention tR, VR, k' 2. Sélectivité d'une colonne α 3. Efficacité d'une colonne N, HEPT, Equations de Van Deempter , Knox, Giddings, Nef 4. Résolution Rs 5. Temps d'analyse Nef / tR 6. Elution linéaire 7. Perte de charge ∆P V. OPTIMISATION DES CONDITIONS D'UNE ANALYSE 1. Optimisation de la résolution 1) Action sur α 2) Action sur k' 3) Action sur l'efficacité 1. Influence de la vitesse de la phase mobile 2. Influence du diamètre des particules

solvants utilisés sont des combinaisons miscibles d'eau et de divers liquides organiques (alcools, acétonurie, dichlorométhane, ...). Souvent, la composition de la phase mobile est modifiée au cours de l'analyse, c'est le mode dit "gradient" ou "élution graduée" (en opposition au mode "isocratique", pour lequel la composition de la phase mobile reste la même tout au long de l'analyse). Par exemple, sur une colonne apolaire, en utilisant un mélange eau/méthanol comme phase mobile, les composants les