Etude Expérimentale De La Phosphatase Alcaline

Etude expérimentale de la phosphatase alcaline I. BUT : Etude cinétique de l’activité enzymatique d’une enzyme la phosphatase alcaline .On procède à :  Une étude cinétique de la libération des produits de la réaction.  Etude de l’influence de la concentration de substrat(PNPP) sur la vitesse de la réaction.  Etude d’un phénomène de compétition entre deux substrats. II. PRINCIPE :  L’ étude cinétique de la libération des produits de la réaction

TP : ETUDE EXPERIMENTALE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE BUT Nous allons déterminer les paramètres cinétiques d’une enzyme en étudiant l’influence de la concentration en substrat et celle de la présence d’un inhibiteur dans le milieu réactionnel. On va mesurer l’activité de l’enzyme en mesurant par spectrophotométrie l’apparition du produit de la réaction qui sera coloré. PRINCIPE Nous allons utiliser dans ce TP la phosphatase alcaline de veau. C’est une enzyme à 2 substrats qui à un pH optimal

ENZYMOLOGIE EN PHASE HOMOGENE: ETUDE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE Les phosphatases ou phosphomonoestérases sont des enzymes qui hydrolysent les monoesters phosphoriques avec formation de phosphate minéral et d'un alcool ou d'un phénol, selon la réaction: R-O-PO32- + → R-OH + HPO42- METHODOLOGIE La manipulation permet l'étude de l'influence de plusieurs facteurs sur la réaction enzymatique. L'enzyme utilisée est une préparation commerciale partiellement purifiée de phosphatase intestinale de veau, la réaction

TP ENZYMOLOGIE ETUDE CINETIQUE DE LA PHOSPHATASE ALCALINE ET DETERMINATION DU PH OPTIMUM Introduction Les phosphatases sont des enzymes qui hydrolysent les monoesters phosphoriques. Ici, on étudiera les effets de l’enzyme sur le PNPP. La phosphatase alcaline hydrolyse le PNPP suivant la réaction suivante : PNPP + H2O PNP Cette réaction libère du PNP. Le PNPP est incolore, alors que le PNP est jaune en milieu alcalin, ce qui permet de le doser directement par spectrophotométrie à 410nm

BCH2008L Enzymologie et Métabolisme ___________________________________________________________________ ETUDE CINETIQUE ET DETERMINATION DU pH OPTIMUM DE LA PHOSPHATASE ALCALINE Les phosphatases ou phosphomonoestérases sont des enzymes qui hydrolysent les monoesters phosphoriques avec formation de phosphate minéral et d'un alcool ou d'un phénol, selon la réaction : R-O-PO32- + H2O  R-OH + HPO42- Méthodologie La manipulation permet l'étude de l'influence de plusieurs facteurs sur la réaction

TP : étude expérimentale de la phosphatase alcaline But Nous cherchons à déterminer les paramètres cinétiques d’une enzyme, la phosphatase alcaline, en présence d’un ou de deux substrats. Pour cela nous avons, dans un premier temps, étudié l’activité de cette enzyme en présence de différentes concentrations d’un seul substrat. Ce qui nous a ensuite permis de l’étudier en présence de deux substrats. Principe Le p-nitrophényl phosphate (PNPP), qui sera notre premier substrat, est un composé

L’ORTHONITROPHENOL oNP-OH TP 2: THERMODYNAMIQUE D’UNE REACTION ASPECTS QUALITATIFS TP 3: ETUDE CINETIQUE D’UNE ENZYME: LA PHOSPHATASE ALCALINE L’objectif des Travaux Pratiques de biochimie est :  d’initier un jeune public attiré par les Sciences de la Vie aux techniques les plus classiques actuellement utilisées dans les laboratoires.  de lui faire acquérir la notion de rigueur expérimentale (soin dans la réalisation des expériences, et à plus long terme dans leur conception).  d’apprendre

signification : on rejette H(au risque 5 %, p < 0.001) Jugement d’interprétation: la valeur de la transferrine est plus basse chez les sujets avec hépatite alcoolique; mais on ne peut conclure à la causalité de l’association sur cette seule étude (qui est une étude d’observation). 2. [pic] Sensibilité = 0.850 Spécificité = 0.975 2 Dans une entreprise utilisant du styrène, on a mesuré le volume globulaire moyen (VGM) chez les mêmes 20 employés pendant une période de

Le concept de tissu 2007 - 2008 Histologie : les tissus - André, Catala, Morère, Escudier, Katsanis, Poirier 17/119 pulation cellulaire pure (par exemple constitution de banque d’ADN complémentaires, étude de l’expression des gènes). 1.1.1.3 Avant le prélèvement, des protocoles expérimentaux plus ou moins sophistiqués sont parfois mis en oeuvre On peut utiliser des procédés classiques comme les excisions, les greffes, les traçages cellulaires. On peut également faire appel à des manipulations

I. Introduction. Le but de l’expérience est d’étudier et de déterminer la cinétique de l’enzyme phosphatase alcaline en fonction de la concentration en substrat et de déterminer son pH optimum (pH pour lequel l’enzyme à la vitesse de catalyse la plus rapide). II. Principe. Afin de suivre la réaction enzymatique, réalisation de dosages spectrophotométriques des produits apparus dans le milieu, quand l’enzyme est en présence de son substrat. Pour le dosage, nous allons utiliser comme substrat