Méthode Electrophorèse Sds Page

mercaptéthanol 4- Centrifugation 5- Congélation 6- Gamme Etalon a- Définition b- Principe α)-BSA β)-échantillon à étudier γ)-réactif de Bradford 7- Électrophorèse a- Définition b- Principe c- Préparation du gel polyacrylamide SDS d- Les % utilisé lors du TP e- Les solutions a préparé α)-tampon d’échantillon β)-tampon d’électrophorèse γ)-gel de séparation λ)-gel de concentration V- traitement

Électrophorèse de protéines et immuno-révélation But Le but du TP est de vérifier la pureté du lysozyme purifié à partir de blanc d’œuf par chromatographie. Pour cela, deux techniques d’électrophorèse ont été utilisées : SDS-PAGE et Western Blot Principe Au cours de ce TP, nous avons utilisé plusieurs méthodes d’analyse de la pureté d’une fraction. Électrophorèse : Généralités L’électrophorèse est une technique analytique basée sur le déplacement de particules chargées dans

1. Plasmide pUT 599 2. Plasmide pUT 654 3. Plasmide pUT 807 4. Intérêt du plasmide pUT 807 II. Principe des méthodes utilisées. 1. La PCR 2. Intérêt de la PCR et conditions opératoires 3. Réactions enzymatiques : restriction et ligation 4. Electrophorèse en gel d’agarose a) Migration/Séparation b) Conditions opératoires c) Visualisation

apparentées----- P8 I.2.B. Propriétés de l’OVAX ---------------------------------------------- P9 I.2.C. Variabilité génétique de l’OVAX et production de variants recombinants------------------------------------------------------------- P10 II Matériels et Méthodes----------------------------------- P14 II.1. Purification des recombinants de l’OVAX----- P14 II.1.A. Préparation préliminaire des solutions tampons----------- P14 II.1.B. Purification par chromatographie d’exclusion HR100 -----P15 II.1.C. Purification

Les protéines des essais 1 et 3 et seulement celles des microsomes des essais 2 et 4 ont été ana- lysées par PAGE-SDS et autoradiographie. Le résultat est présenté fig. 1: 2. Après ceOe expérience in vitro, les chercheurs ont mené une expérience in vivo en introduisant directement les ARN messa- ger codant la Protéase D dans le cytoplasme des ovocytes de Xenopus

sous-clonage seront abordées : PCR, digestion par des enzymes de restriction, séparation de fragments d’ADN sur gel d’agarose, culture de bactéries. La  SNAP sera purifiée par chromatographie d’affinité et analysée sur gel d’acrylamide par la méthode SDS-PAGE. Elle sera identifiée par des anticorps spécifiques (techniques de Western blot et d’ELISA). Concepts clefs et difficultés attendues : Distinguer techniques acides nucléiques et techniques protéines. Distinguer séquence codante des autres

. 34 C. Induction de protéines par le pyrène, le phénanthrène et le benzoate................ 37 4. Objectifs de la thèse.............................................................................................. 41 Chapitre 2 – MATERIEL ET METHODES..........................................................43 1. Techniques de microbiologie et de génétique microbienne........................ ...... 43 A. Souches et plasmides.....................................................................

Méthodes d'étude de la protéinurie[modifier | modifier le code] La bandelette urinaire[modifier | modifier le code] La bandelette urinaire est une méthode colorimétrique qui donne une évaluation semi-quantitative de la protéinurie à partir de 50 à 100 mg pour l'albumine1. Elle ne détecte pas les chaînes légères d'immunoglobulines ni les autres protéines de bas poids moléculaire. De plus, elle se positive anormalement lorsque les urines sont basiques (pH>8) ou en cas d'infection urinaire. Il s'agit

peptides : 1 séance à faire en priorité : exo n° 1, 2, 3. Conformation des protéines: à faire en priorité : exo n° 2,3. 1 séance Manipulations sur ordinateur : 1 séance en salle informatique, se reporter au tableau d'affichage pour les lieux et dates Méthodes d'analyse et de séparation des protéines : 2 séances à faire en priorité: exo n° 1,2 et 3. p3 p10 p16 p21 Thème 5 : Lipides (en 1,5 séances) à faire en priorité : exo n° 1, 2 et 3. Annales : examen session 1 2010 p39 p45 2

des ADN 1.2.Extraction des ARN 1.3.Extraction des 1.3.1. Rappel sur les plasmides plasmides 1.3.2. Purification par Lyse alcaline 1.3.3. Purification par Gradient de chlorure de césium 2.Séparation des acides nucléiques 2.1.Electrophorèse sur gel d’agarose 2.2.Electrophorèse sur gel de polyarylamide 3.Elaboration de Cartes de restrictions des 1.Purification des acides 1.1.Extraction nucléiques de =technique l’ADN permettant d'isoler l'ADN de cellules ou de tissus. L'ADN extrait  digestion