Protoplaste

chimique possédant la faculté de déstabiliser la membrane plasmique des protoplastes, permettant ainsi la pénétration des molécules d'ADN, * l'électroporation, plus délicate à maîtriser, consiste à appliquer de courts chocs électriques de fort voltage aux protoplastes, ce qui permet l'ouverture de pores facilitant le passage de l'ADN. Le principal problème de ces deux méthodes est la faible capacité de régénération des protoplastes ainsi que le risque de voir apparaître un transfert de plusieurs copies

permettent de transférer des gènes sélectionnes d'un organisme a un autre y compris entre des espèces différentes. Protoplaste : La paroi cellulaire donne sa forme et sa rigidité à la cellule végétale. Si on ôte cette membrane de la cellule, il ne lui reste alors que la membrane plasmique, qui renferme le cytoplasme, la vacuole et le noyau. Cette cellule est maintenant un protoplaste. Celui-ci prend une forme sphérique, il pourra retrouver sa forme d’origine en reformant une nouvelle paroi. Gène :

poubelles aux cellules végétales, à la fin de la vie de la cellule, ces vacuoles prennent 90 % de l'espace cellulaire. une paroi pectocellulosique faite de cellulose et de protéines, ainsi que de lignine dans de nombreux cas, et déposée par le protoplaste à l'extérieur de la membrane cellulaire. Elle s'oppose à la paroi cellulaire des champignons, faite de chitine, et des procaryotes, faite de peptidoglycanes. les plasmodesmes, reliant les pores de la paroi cellulaire, ce qui permet à chaque cellule

L’électroporation : L'électroporation est une des techniques les plus simples à mettre en œuvre. Elle consiste à soumettre un mélange de protoplastes et d'ADN à des chocs électriques. Le champ électrique provoque la déstabilisation de la membrane plasmique du protoplaste et conduit à l'ouverture des pores membranaires, facilitant ainsi le passage de l'ADN dans le noyau. Or, les protoplastes baignent dans une solution de plasmides. Ces derniers passent donc très facilement dans la cellule qui se trouve à son tour

plus simple pour la culture in vitro est la graine. Avec les morceaux de tissus on obtient des plantes diploïdes, avec des grains de pollen ou l’ovaire on obtient des plantes haploïdes. La cellule la plus simple et la plus petite utilisée est le protoplaste. C’est une cellule sans paroi contenant les chloroplastes. N’ayant pas de paroi la pénétration de l’ADN est facilitée. La transgenèse C’est l’introduction d’un gène dans un tissu végétal par différentes méthodes : Transfert direct :

(certaine archébactéries). Certaine bactéries peuvent vivre sans paroi en milieu hypotonique. Lysozyme (ex: dans larmes): Coupe le lien Beta-1,4, entre les deux sucres Pénicilline : Empêche le lien entre les peptidoglycane 10) Lyse et formation de protoplaste 11) Archea (Pseudopeptidoglycane, les couche S et les parois) Pseudopeptidoglycane: Pas Uramique, Liaison Beta-1,3, Résistants lysozyme et pénicillines Couche S: Surface paracristalline, composé protéine ou glycoprotéine, symétrie hexagonale

prolongée provoque la mort de la cellule. D’autre part, la paroi permet à la cellule de ne pas éclater sous l’effet de cette pression. La preuve est fournie par une suspension de protoplastes. Les protoplastes sont des cellules végétales privées de leur paroi (attaque enzymatique). Dans un milieu où l’eau pénètre dans les protoplastes, ces derniers éclatent. ------------------------------------------------- La fonction de la paroi squelettique [modifier] Une fois la taille de la cellule acquise, la paroi

somatique de protoplastes. La reproduction sexuée utilise les gamètes des parents (grains de pollen et ovules). Pour permettre le développement complet des embryons, il a fallu faire appel à la technique de culture in vitro appelée sauvetage d’embryon interspécifique : après la fécondation, les embryons prélevés précocement sont mis en culture sur un milieu artificiel nutritif. Technique de sauvetage d’embryon interspécifique GNIS L’hybridation somatique de protoplastes issus de

microparticules enrobées d'ADN (biolistique) ;  Soit l'introduction d'ADN dans des protoplastes, par action d'un agent chimique ou d'un champ électrique (électroporation). Les cellules issues de différents types de tissus végétaux peuvent être soumises à la transformation. Selon les espèces, ce seront des disques foliaires, des sections de tige, des cotylédons, des embryons, des microspores ou des protoplastes. Par exemple, chez le tabac et la tomate, on utilise des disques foliaires ; chez la

microparticules enrobées d'ADN (biolistique)   soit l'introduction d'ADN dans des protoplastes, par action d'un agent chimique ou d'un champ électrique (électroporation). Les cellules issues de différents types de tissus végétaux peuvent être soumises à la transformation. Selon les espèces, ce seront des disques foliaires, des sections de tige, des cotylédons, des embryons, des microspores ou des protoplastes. Par exemple, chez le tabac et la tomate, on utilise des disques foliaires ; chez