Pyruvate déshydrogénase

1 LA LACTATE DESHYDROGENASE: PURIHCATION PARTIELLE PAR CHROMATOGRAPHIE D'AFFINITÉ La lactate deshydrogénase catalyse la réaction: L lactate + NAD+ < - > pyruvate + NADH +H+ La lactate deshydrogénase (LDH) est un tétramère constitué de quatre sous-unités de 35 kDa. Chez les mammifères deux types différents de sous-unité existent, le type* M (pour muscle) et le type H (pour heart), ce qui correspond à cinq formes d' isoenzymes tétramériques: MH3, H4 M4, M3H, Bien que ces formes

  0,18   1,83   18,33   18,33   10,48   1,98   50   0,2   1,96   19,61   19,61   16,67   6,67     Exercice  6  -­‐  Activité  de  la  6-­‐phosphogluconate  déshydrogénase   On  étudie  l'activité  de  la  6-­‐phosphogluconate  déshydrogénase  sur  son  substrat  le  6-­‐phosphoguconate.  La   vitesse  de  réaction  est  exprimée  en  unités  arbitraires.  Le  deuxième  substrat  est  maintenu  à  concentration

Oxydation : perte d’électrons / Réduction : gain d’électrons La chaine respiratoire : 4 complexes + 2 transporteurs mobiles d’électrons (Coenzyme Q, cytochrome c) + ATP synthase (F1 et F0). Complexe 1 : NADH déshydrogénase : NADH  NAD+ + H+ Complexe 2 : succinate déshydrogénase : succinate  fumarate. Complexe 3 : cytochrome b-c1 Complexe 4 : cytochrome c oxydase : ½ O2 + 2H+  2 H2O Le gradient électrique du aux réactions de la chaine respiratoire va être la source de production de l’ATP

fabriquer le lactate, elles ont besoin du pyruvate. Le pyruvate produit du lactate grâce à une enzyme le lactate déshydrogénase. Pour ce faire cette réaction a besoin d’un cofacteur appelé NADH,H+ car les bactéries homolactiques ont besoin d’oxygène. Le pyruvate dont nous avons besoin pour la réaction provient de la voie métabolique appelée la glycolyse. C’est également de cette voie que provient le NADH ,H+ qui est utilisé pour la transformation du pyruvate en lactate. En effet le NADH,H+ est catalysé

1. But du TP L’objectif de ce TP est de purifier une solution contenant de nombreuses protéines afin de récolter l’enzyme lactate déshydrogénase et déterminer son activité spécifique. 2. Principe La lactate déshydrogénase (LDH) est l’enzyme catalysant la réaction : L-lactate + NAD+ Pyruvate + NADH + H+ Elle existe sous 5 formes rmes d’isoenzymes qui différent par leur pH isoélectrique. ➢ Chromatographie d’affinité Afin de la purifier un extrait de tissu fœtal bovin contenant

La Lactate déshydrogénase. Lactate déshydrogénase : purification partielle par chromatographie d'affinité La lactate déshydrogénase (LDH) est une enzyme qui catalyse la conversion réciproque de la pyruvate et de la lactate accompagnée de la conversion concomitante du NADH en NAD+ (et inversement). Ce tétramère est composé de 4 sous unité (isoenzyme) différents de par leurs constances cinétiques et leurs pH isoélectriques. Introduction : Dans cette manipulation nous cherchons à séparer

Krebs en aérobiose et en anérobiose _________ 51 Rôle du cycle de Krebs dans la sporulation __________________________ 53 A la jonction entre la glycolyse/néoglucogenèse et le cycle de Krebs ________ 54 Le complexe pyruvate déshydrogénase (EC 1.2.4.1) pdhABCD __________ 54 La pyruvate carboxylase pycA (EC 6.4.1.1) __________________________ 54 La phosphoénolpyruvate carboxykinase pckA (EC 4.1.1.49) _____________ 55 L’enzyme malique (EC 1.1.1.38-40)________________________________ 55 1.4.1. 1.4

l’hydrolyse d’une liaison osidique par le lysozyme Mécanisme de l’activation de la tyrosine par une aminoacyl-tRNA synthétase Mécanisme d’action et classification des coenzymes Les coenzymes nucléotidiques Le motif de liaison des nucléotides et les déshydrogénases NAD-dépendantes Le domaine de liaison du FAD est semblable au domaine de liaison du NAD Le domaine de liaison de l’ATP est, lui aussi, semblable au domaine de liaison du NAD Le coenzyme A Le thiamine pyrophosphate Le pyridoxal phosphate Rôle des

Quel est le déficit enzymatique chez ce patient ? Faculté de Médecine Pierre & Marie Curie Cahier d'Exercices en Biochimie / PCEM1 Métabolisme glucido-lipidique / 4 2. NEOGLUCOGENESE 2.1 Dans la néoglucogenèse, lorsqu’on passe du pyruvate au glucose, quatre enzymes sont requis pour contourner les étapes irréversibles de la glycolyse : vous les citerez et écrirez les réactions catalysées. 2.2 Variation du lactate sanguin lors d’un exercice intense. Les concentrations de lactate

enzymatiques • glucose (C6H1206) ➞ 2 pyruvates (C3H3O3-) • Glucose + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+ ➞ 2 pyruvates + 2 ATP + 2 NADH + 2H+ + 2H2O • Anaérobiose • Intracytosolique • ATP : – Consommation : 2 – Production : 4 – Bilan : 2 • Produits terminaux : – Anaérobiose : Lactate * Glucose + 2 ADP + 2 Pi ➞ 2 lactates + 2 ATP + 2H2O – Aérobiose : Pyruvate * Glucose + 2 ADP + 2 Pi + 2 NAD+ ➞ 2 pyruvates + 2 ATP + 2 NADH + 2H+ + 2H2O * le pyruvate entre dans la mitochondrie puis