Réaction enzymatique

Protocole expérimental Partie 3 - Chapitre 1 La catalyse enzymatique Une transformation catalysée par les enzymes Le suivi plus précis de la réaction enzymatique au cours du temps p. 167 ◾◾Matériel • Comprimé d’amylase • Empois d’amidon à 1 g.L1 • Solution d’eau iodée • Compte-goutte • Fiole jaugée 50 mL • Pilon et mortier • Cuve de spectroscopie • Interface EXAO avec turbidimètre ou colorimètre ◾◾Préparation Solution enzymatique - Broyer le comprimé d’amylase à l’aide du pilon et du mortier

Du Génotype au Phénotype : le rôle des protéines TP 2 : les enzymes sont des biocatalyseurs OBJECTIF : A chaque instant, des milliers de réactions chimiques distinctes se produisent dans les cellules de notre corps. Ces réactions dépendent de la présence d’enzymes. On cherche à comprendre comment ces réactions peuvent avoir lieu dans des conditions physico-chimiques compatibles avec la vie. QUELQUES RAPPELS : - l’amidon est une macromolécule, c’est un polymère de glucose. Son hydrolyse conduit

Chapitre 4: Vitesse initiale d’une réaction enzymatique et équation de MICHAELISPr. Richard G. Maroun Enzymologie Fondamentale et Moléculaire EFMBL4Chapitre 4: Étude des réactions enzymatiques à l’état stationnaire (un seul substrat). Vitesse initiale d’une réaction enzymatique et équation de MICHAELIS Pr. Richard Maroun 21. Les enzymes Michaeliennes  Il existe plusieurs mécanismes enzymatiques différents selon l'enzyme considérée:  Les enzymes dites michaeliennes: Chaque site actif se comporte

étudierons les facteurs qui influencent les réactions enzymatiques. I. Les caractéristiques des enzymes. Une enzyme est une protéine, elle est constituée d’une chaine d’acides aminés. Elle accélère les réactions chimiques au sein de l’organisme, c’est un catalyseur. L’enzyme possède deux spécificités, une spécificité de substrat car elle n’agit que sur un seul type de molécule et une spécificité d’action car elle ne catalyse qu’un seul type de réaction chimique. Au cours de la transformation, l’enzyme

concentration en substrat et de la présence d’un inhibiteur sur la vitesse de réaction. Dans ce TP, nous allons utiliser une préparation commerciale de phosphatase alcaline de veau. Il s’agit d’une enzyme alcaline à 2 substrats, capable d’hydrolyser les monoesters phosphoriques selon la réaction suivante : R-O-PO3 2- + H2O R-OH + HPO4 2- II. Principe Afin de suivre la réaction enzymatique, nous allons réaliser un dosage spectrophotométrique des produits apparus

l’activité enzymatique d’une enzyme la phosphatase alcaline .On procède à :  Une étude cinétique de la libération des produits de la réaction.  Etude de l’influence de la concentration de substrat(PNPP) sur la vitesse de la réaction.  Etude d’un phénomène de compétition entre deux substrats. II. PRINCIPE :  L’ étude cinétique de la libération des produits de la réaction. La phosphatase alcaline est dosée en suivant, en fonction du temps, l’apparition des produits de la réaction :

inhibiteur dans le milieu réactionnel. On va mesurer l’activité de l’enzyme en mesurant par spectrophotométrie l’apparition du produit de la réaction qui sera coloré. PRINCIPE Nous allons utiliser dans ce TP la phosphatase alcaline de veau. C’est une enzyme à 2 substrats qui à un pH optimal alcalin et qui hydrolyse les monoesters phosphoriques selon la réaction suivante : R-O-PO32- + H2O  R-OH + HPO42- Dosage spectrophotométrique Un dosage spectrophotométrique permet de mesurer l’absorbance

ACTIVITÉ ENZYMATIQUE DE LA CATALASE¸ Par Clarence Beaulieu Nicholas Plante Jérémie Rompré Travail remis à Justin Rousseau Enseignant Dans le cadre du cours NYA-101-05 Évolution et Diversité du vivant Groupe 06 Cégep de Saint-Hyacinthe 29 septembre 2015 Tableau des résulats : Variation de pression des différents types de solution durant 100 secondes Variations Pression initiale (kPa) Pression finale (kPa) Activité enzymatique (kPa/min) Témoin 96,2 125

initiales. Il apparaît 0,672x10-2 moles de glucose en 10 minutes. On a introduit dans le milieu 1 mL de solution enzymatique dont la teneur en protéines est de 2,85 g.L-1. a) Ecrire l’équation de la réaction b) Que signifie le terme « conditions initiales », Préciser les conditions de concentrations en substrat. c) Calculer la concentration d’activité catalytique de la préparation en enzymatique en UI.mL-1 et en Kat.mL-1 d) Calculer l’activité spécifique de l’enzyme en UI.mg-1 et en Kat.mg-1 e) Calculer

12 : les phénomènes mécaniques et biochimiques de la digestion Etude de la spécificité des enzymes de la digestion Objectifs : o Suivre une réaction enzymatique au cours du temps o Mettre en évidence l’action d’une enzyme o Mettre en évidence la spécificité des enzymes, o Identifier le groupe caractéristique des espèces chimiques impliquées dans la réaction d’hydrolyse de l’amidon Activité 1 : Etude de la structure de quelques enzymes Document 1 : Modélisation spatiale de l’α-amylase (Une seule