Réaction enzymatique

Cinétique enzymatique 1. Que devient la valeur de v /Vmax quand [S ] = 4 K m ? 2. Si Vmax = 100 μmol / ml / s et Km = 2mM, quelle est la vitesse de la réaction quand [S]=20 mM ? 3. Dans une réaction à cinétique de type Michaelis-Menten, k1 = 7 X 10 7 M −1 s −1 , k −1 = 1 X 103 s −1 , et k 2 = 2 X 10 4 s −1. Quelles sont les valeurs de Ks et de Km? La fixation du substrat atteint-elle l’équilibre ou plutôt l’état stationnaire? 4. Les résultats suivants sont obtenus au cours d’une réaction enzymatique

vitesse de réaction est constante. La période pendant laquelle la vitesse de réaction est constante définit les conditions initiales. Dans les conditions initiales, la vitesse d’une réaction enzymatique est constante est s’appelle la vitesse initiale. b. Partie AB La courbe s’incurve. Dans cette partie, la vitesse de réaction diminue. c. Partie BC La courbe est parallèle à l’axe des abscisses. La concentration en produit n’évolue plus en fonction du temps : la vitesse de réaction est nulle

substrat par l’enzyme TP 3 : La catalyse enzymatique (partie I) La courbe décrivant l’évolution de la vitesse initiale d’une réaction catalysée par une enzyme en fonction de la concentration du substrat présente un plateau de saturation. Celui-ci peut s’expliquer si le substrat se lie à l’enzyme et si, à partir d’une concentration donnée en substrat, tous les sites de liaison enzyme-substrat sont occupés par l’enzyme. La double spécificité enzymatique implique des interactions étroites entre

d'enthalpie : ΔH = ΔE + PΔV car on travail à pression constante → ΔH = Q + W + PΔV → ΔH = Q – PΔV + PΔV donc en chimie : ΔH = Q ← la variation d'enthalpie se traduit alors en chaleur Si ΔH > 0 alors la réaction est endothermique (consommation de chaleur) Si ΔH < 0 alors la réaction est exothermique (libère de la chaleur) photosynthèse

donc compte de l’activité enzymatique. Les différents paramètres cinétiques de notre enzyme sont reliés par l’équation de Michaelis-Menten : v=Vm×[S]KM+ [S] * Dosage spectrophotométrique Le principe est de mesurer à l’aide le spectrophotomètre l’absorbance d’une solution pour une longueur d’onde donnée. Cette mesure est directement proportionnelle à la concentration du produit étudié. Or la concentration de ce produit est le fruit d’une activité enzymatique plus ou moins intense de la

développement d’un essais enzymatique, il est important de connaître la valeur de Km de l’enzyme et d’ajuster la valeur de Vmax afin que l’essais est accompli dans le minimum de temps requis pour une précision donnée. Il y a quatre méthodes graphiques pour établir les valeurs de Km et Vmax dans des conditions expérimentales données: Lineweaver-Burk, EadieHofstee, Hanes et Cornish-Bowden-Eisenthal. Les quatre méthodes nécessitent des données expérimentales pour la vitesse initiale de la réaction en fonction de

qui joue un rôle de catalyseur biologique, c'est à dire qui augmente la vitesse de réaction. Elle facilite une réaction biochimique, transformation chimique d'une substance en une autre substance à l'intérieur du corps. Sans pour autant en modifier les produits. Elle est capable d'abaisser l'énergie d'activation, donc la quantité d'énergie nécessaire pour lancer un processus chimique et ainsi d'accélérer les réactions chimiques du métabolisme mais sans modifier l'équilibre formé. Les enzymes agissent

facteur de dilution ex : dilution 1/50) le plus souvent on veut retrouver l’AE initiale, après avoir fait les mesures sur la solution diluée : e AEi = AEf x Vf/Vi ex : pour la dilution au 1/50 : AEi = AEf x 50 Résolution de QCM → Activité enzymatique • On constate après incubation de 30 minutes, en présence de 0,5 ml d’un sérum dilué 100 fois, une hydrolyse de 150 nmol de paranitrophénylphosphate, substrat de la phosphatase alcaline. L’activité phosphatase alcaline du sérum, exprimée en

 UE 1 Biochimie M. CHIKH 17 pages Enzymologie I. POUVOIR CATALYTIQUE ET CINETIQUE 2 I.A. Généralités 2 I.B. Catalyse enzymatique 3 I.C. Cinétique enzymatique 5 II. REGULATION DE L'ACTIVITE 10 II.A. Régulation par modifications covalentes 10 II.B. Régulation par allostérie 11 III. MESURE DE L'ACTIVITE 13 III.A. Principe 13 III.B. Conditions expérimentales 13 III.C. Modalités de mesure 14 III.D. Résultats 15 III.E. Intérêt médical 15 IV. ISOENZYMES 15 V. COENZYMES ET VITAMINES 16 V.A. Principes

capteurs enzymatiques) pour détection et dosage immédiat et donc de contrôle en temps réel d’un produit donné L’avenir des enzymes sera plus prometteur Dès que la protéine sera : plus efficace, plus stable , et d’une durée de vie plus longue ce qui nous conduit à parler de: superenzyme Enzymologie 2010/2011 Pr Mohammed Bekkali Université Hassan II Casablanca Enzymologie 2010/2011 Pr Mohammed Bekkali Université Hassan II Casablanca A+B A-B C+D Réaction en milieu