Southern blot

de la cathode vers l'anode. Les fragments les plus petits sont les plus rapides. 4) L'ADN est transféré sous forme dénaturée sur une membrane de nylon. La position relative des fragments d'ADN est préservée durant le transfert. 5)Méthode du Southern Blot : La membrane est incubée dans une solution contenant une sonde marquée préalablement, soit par la radioactivité, soit chimiquement. La sonde s'hybride alors avec le ou les fragments d'ADN avec lesquels elle présente une homologie. On utilise

Détection, caractérisation et identification des acides nucléique Marquage et suivi des acides nucléiques Marquage radioactif Marquages froids : colorimétrie, fluorescence ; chimioluminescence ; Hybridation moléculaire Southern Blot Northern Blot Dot Blot Hybridation in situ (HIS) Amplification et sélection d’acides nucléiques particuliers PCR RT-PCR Clonage Construction de banques Criblage de banques Utilisation des vecteurs recombinés I.1. Préparation des acides

Ensuite on fait une dénaturation de l'ADN par la soude pour obtenir de l'ADN monocaténaire. Après on procède à un transfert sur membrane et un renforcement de la fixation. Ensuite les fragments de restriction contenus dans le gel sont analysés par Southern Blotting et révélés avec une ou plusieurs sondes. [pic] Et pour finir il ne reste plus qu’à comparer les sites de restriction car ils varient selon l’individu et les positions de certaines bandes d'ADN puisqu’elles ont des positions différentes

HYBRIDATION MOLÉCULAIRE (SOUTHERN BLOT-NORTHERN BLOT) Plan • Introduction • Hybridation • Les différents types d’hybridation Hybridation en phase liquide Hybridation sur support solide Hybridation in situ (HIS) • Hybridation de type Southern • Hybridation de type Northern • Conclusion introduction Longtemps considérées comme essentiellement intéressantes à titre rétrospectif et épidémiologique, les méthodes de diagnostic virologique se sont considérablement diversifiées et

avec les autres sciences biologiques « à l'échelle moléculaire » * 2 Techniques de biologie moléculaire * 2.1 Clonage d'expressions * 2.2 Réaction en chaîne par polymérase * 2.3 Électrophorèse * 2.4 Southern blot * 2.5 Northern blot * 2.6 Western blot * 2.7 Puce à ADN * 2.8 Technologie abandonnée * 2.9 Histoire * 3 Liste de quelques biologistes moléculaires connus * 4 Notes et références * 5 Voir aussi * 5.1 Bibliographie * 5.2 Articles

Criblage d'une banque Criblage avec une sonde qui reconnaît l'ADN IGM Criblage d'une banque Notion de stringence IGM Criblage d'une banque Criblage avec une sonde qui reconnaît une protéine IGM Le Northern blot IGM Le Southern blot 

Electrophorèse sur gel de polyarylamide 3.Elaboration de Cartes de restrictions des 1.Purification des acides 1.1.Extraction nucléiques de =technique l’ADN permettant d'isoler l'ADN de cellules ou de tissus. L'ADN extrait  digestion, hybridation (Southern blot), séquençage, PCR, clonage… Différents protocoles pour extraire l'ADN avec même schéma de principe : •Lyse des cellules •Elimination des protéines •Elimination des autres acides nucléiques (ARN...) 4 TD1.TECHNIQUES DE SEPARATION ET D’ANALYSE DES

photométrique IV.4.1.6. Titration d’un sérum pour la recherche d’anticorps IV. dIagnostIc VIral 4. techniques diagnostiques 10 IV. Diagnostic viral > 4. techniques diagnostiques Western blot lorsqu’on confirme un résultat obtenu en sérologie de routine, on utilise parfois un test dit Western blot (WB), qui est une modification du principe ElIsa énoncé plus haut. dans le test WB, les protéines d’un lysat viral sont séparées en électrophorèse sur gel de polyacrylamide (PagE), ensuite transférées

• Le test E.L.I.S.A. est un test immunologique ; il permet de détecter des anticorps sécrétés en réponse à une infection. • Il est utilisé pour le dépistage du SIDA avec un second test de confirmation par immuno-transfert (Western-blot) • Nous allons détecter la présence d’anticorps anti-BSA ( Bovine sérum albumine) dans le sérum d’un lapin La première étape : le « cotting » a été réalisée par le fournisseur; il s’agit de tapisser le fond des puits avec la BSA par effet électrostatique Deuxième

RÉACTION DE PRÉCIPITATION 2 : EEN MILIEU GÉLIFIÉ : 2.1 IMMUNODIFUSION DOUBLE (OUCHTERLONY) 2.2 IMMUNODIFUSION LAURELL 2.3 IMMUNODIFUSION RADIALE (MANCINI) 2.3 IMMUNO ELECTRIIMMUNODIFFUSION A – IMMUNOENZYMOLOGIE TECHNIQUES DÉRIVÉS (WESTERN BLOT) TECHNIQUES DERIVES DE LIMMUNOFLUORESCENCE (CYTOMÉTRIE EN FLUX) FSC Laser Miroirs dichroïques PMT SSC Le cytomètre enregistre le comportement de la cellule quand celle-ci passe devant le laser en mesurant: 1- La diffusion de la lumière incident