Tp Spectrophotometrie

UNIVERSITE DE LA REUNION Faculté des Sciences et Technologies Département de Biochimie et Biologie Moléculaire Année Universitaire 2011-2012 UE S34BC22 TP 1: L’ORTHONITROPHENOL oNP-OH TP 2: THERMODYNAMIQUE D’UNE REACTION ASPECTS QUALITATIFS TP 3: ETUDE CINETIQUE D’UNE ENZYME: LA PHOSPHATASE ALCALINE L’objectif des Travaux Pratiques de biochimie est :  d’initier un jeune public attiré par les Sciences de la Vie aux techniques les plus classiques actuellement utilisées dans les laboratoires

TP extraction et analyse TP CH C7 Dosage par étalonnage de l’élément fer dans un vin blanc Thème : Effectuer des contrôles de qualitéCompétences exigibles  : ( Distinguer un dosage par étalonnage d’un dosage par titrage d’après le protocole expérimental ( Exploiter une courbe d’étalonnage Objectifs du TP  : Déterminer la concentration massique en élément fer dans un vin par : · utilisation d’une échelle de teinte · utilisation d’un spectrophotomètre

démarche (approche expérimentale, raisonnement qualitatif ou par analogie, modélisation) sont soulignées. Les travaux pratiques et les TPcours, sont les temps forts de cet enseignement. Le découpage en une approche théorique et une partie fondée sur les TP-cours prend acte du fait que les travaux pratiques représentent la moitié de l’horaire de chimie de la classe. Un autre objectif est de faire prendre conscience aux étudiants que la chimie participe au développement des sciences et débouche sur d’importantes

Purification du lysozymeBut :Le but de ce TP est de purifier un lysozyme, qui est une enzyme présente dans le blanc d’œuf. Pour cela, nous allons, dans un premier temps, séparer les constituants de notre mélange grâce à une chromatographie échangeuse d’ions, puis nous allons doser l’activité enzymatique du lysozyme par dosage spectrophotométrique. Enfin, nous allons réaliser un dosage de protéine grâce au réactif de Bradford et une gamme étalon. Principe  :Chromatographie

Mesures Physiques Annecy – MPh2 SE3 ME3 – 2011 – Philippe Galez Techniques spectroscopiques d’analyse / Spectrophotométrie UV/visible ______________________________________________________________________________________________ SPECTROMÉTRIE UV / VISIBLE La spectrophotométrie UV / Visible repose sur l'interaction du rayonnement électromagnétique et de la matière dans le domaine s'étendant du proche UV au très proche IR soit entre 180 et 1100 nm. Cette partie du spectre est relativement pauvre

travaux pratiques illustrent les cours de Biochimie de la 1ère et de la 2ème année de la Licence BB. Le coût élevé de certains appareils nous oblige à adopter une organisation par manipulations tournantes. Pour pallier le déphasage inévitable de certains TP avec le cours, un bref exposé théorique vous donne ou vous rappelle les connaissances nécessaires à la compréhension de votre manipulation. I - Conseils pour la pratique des manipulations de Biochimie I-1 Opérez avec soin et avec méthode tout en

destructive : la spectrophotométrie a. Définitions Transmittanse T : Rapport du flux lumineux transmis I et flux lumineux incident I0 T = I/ I0 - Absorbance A : il s’agit du logarithme décimal de l’inverse de la transmettance T. Pour une radiation incidente monochromatique de longueur d’onde λ et d’intensité I0, I 1 l’absorbance est définie par : A = log( 0 ) = log( ) avec I intensité lumineuse à la sortie de la I T cuve. b. Principe La spectrophotométrie est l’étude des

1ère BTK – 04/02/2016 Page 1 sur 3 TP 16 : Détermination de la masse de colorant Bleu de patenté V contenue dans un bonbon HARIBO par spectrophotométrie OBJECTIFS :  Préparer des solutions par pesée ;  Réaliser puis analyser le spectre d'absorption d'une biomolécule ;  Exprimer les résultats en utilisant les unités adéquates. Contexte : pour son anniversaire, Sacha reçoit un paquet de Schtroumpfs Haribo. Il mange au total 15 schtroumpfs. Questionnement : Quelle quantité de colorant

pour la verrerie.- Cuve à chromatographie fermée contenant déjà l’éluant, un tube à hémolyse. - Plaque CCM, capillaires ou pipettes pasteurs. - Poudre inconnue (curcuma). - Poudre de curcumine. - Petite pipette en plastique. - Six cuves pour spectrophotométrie UV-Visible.Documents mis à disposition des élèves :- Données relatives aux risques et à la sécurité de l’éthanol à 95°, du cyclohexane et du tétrachlorométhane. - Tableau de solubilité de la curcumine dans l’eau, l’éthanol, le cyclohexane et

 TP 2 Protéine-Enzymologie-Métabolisme Purification partielle et dosage de l'activité enzymatique de la β-galactosidase La β-galactosidase comme nous l'avons vu au précédent TP, est une enzyme présente chez les micro-organismes, les animaux et les plantes et qui a pour principal substrat le lactose, qu'elle catalyse en galactosidase et glucose. Pour réaliser notre TP2, nous avons utilisé