Transfection

...............................................................26 iv 2.2 2.3 2.4 2.5 2.6 2.7 2.8 2.9 2.10 2.11 3 MUTAGENÈSE DIRIGÉE SUR EIF2α .........................................................................26 CULTURE CELLULAIRE ET TRANSFECTION ..............................................................27 INDUCTION DE STRESS CHEZ LE PARASITE ..............................................................27 PRODUCTION ET PURIFICATION DE EIF2α RECOMBINANT ............................

Réalisation d'une construction génique ou gène artificiel. (2) Recombinaison puis insertion du fragment d'ADN dans le plasmide Ti désarmé (privé de la séquence ONC, fonction oncogène) puis introduction du plasmide Ti modifié dans la bactérie hôte. (3) Transfection du plasmide modifié dans des feuilles, par Agrobacterium (4) Contrôle de l'efficacité du transfert et sélection des organes exprimant le gène transféré. b) Le transfert direct de gènes : Il existe des techniques de transfert direct d'ADN

SV40 (Paul Berg, David Jackson, Robert Symons) - Annonce du Cray 1, crée par Seymour CRAY (cf. interview, 1996): 1er super-ordinateur à architecture vectorielle. 1973 : Découverte des enzymes de restriction. - Obtention d'une méthode fiable de transfection (introduction d'un ADN étranger) des cellules eucaryotes grâce à un virus (vecteur). (Franck Graham et Alex Van der Eb). - Développement de l'ALTO de Xerox suite aux recherches démarrées en 1970. Ce prototype, pensé pour devenir le bureau du futur

(24 acides aminés) comportant un acide aminé chargé (D), et d'une région intracytoplasmique de 47 acides aminés comportant un motif ITAM. La fonction biologique de cette séquence a été confirmée notamment par des expériences de mutagenèse et de transfections. La stratégie de clonage utilisée a montré que ce gène est l'orthologue du gène humain DAP-12 (Lanier et al., 1998). III.5. Collaboration avec le groupe du Pr. G. Gillet Le groupe du Pr. Gillet s'intéresse à la protéine Nr-13 de la caille du

MC, Vianney A, Lazzaroni JC. Energy-dependent conformational change in the TolA protein of Escherichia coli involves its N-terminal domain, TolQ, and TolR. J Bacteriol 2001;183:4110-4. 27. Gheit T, Sekkat S, Cova L, et al. Experimental transfection of Macaca sylvanus with cloned human hepatitis B virus. J Gen Virol 2002;83:1645-9. 28. Gruffat H, Batisse J, Pich D, et al. Epstein-Barr virus mRNA export factor EB2 is essential for production of infectious virus. J Virol 2002;76:9635-44