Transformation De Bacteries

Chapitre 3 : Transformation des bactéries avec l’ADN plasmide, purification et caractérisation de l’ADN plasmide Transformation des bactéries par l’ADN plasmide et purification de l’ADN plasmide Matériaux : 1 aliquot de 15µL d’ADN plasmide stérile (pGFP-actin à 12ng/µL) 200mL de milieu LB stérile à température ambiante (dans un erlenmeyer couvert de papier d’aluminium) 3 pétris gélose LB-ampicilline (50µg/mL) 1 pétri gélose LB 50mL de CaCl2 à 100mM, 4°C Solution saturée de bactéries DH5alpha

TP de génie génétique Transformation de bactéries rendues compétente par un traitement au chlorure de calcium Puis la préparation et l’analyse d’ADN plasmidique Transformation d'E.coli rendues compétente par un traitement au chlorure de calcium Principe 1) préparation des cellules compétentes Avant le début du TP, les cellules à traité ont été préalablement mis culture jusqu’à leur phase exponentielle de croissance, car dans cette phase les cellules sont en division ce qui facilitera

 PROJET DE FIN D’ETUDES Option : BIOLOGIE CELLULAIRE ET MOLECULAIRE (SVI) EXTRACTION D’ADN PLASMIDIQUE ET TRANSFORMATION D’ESCHERICHIA COLI PAR UN PLASMIDE Présenté par : •USANASE VIVENS Soutenu, le 28 Juin 2013

……………………………………………………………… 3. Transformation et Sélection des bactéries transformées a) transformation de bactéries ………… ………………………………… b) Sélection des bactéries transformées ……………………………. B. Transformation et Sélection de plantes transgéniques avec la construction que l’on vient de réaliser …………………………… 1. Transformation des Agrobacterium tumefaciens ……………………………… a) Introduction : les Agrobacterium tumefaciens et leurs modes d’action. b) Transformation d’agro bactéries électro compétente

de très petite taille. Manuel de transformation du lait/Chapitre 4 :I oto Ph A. van Leeuwenhoek, 1632-1723, autodidacte hollandais. Il fabriqua le microscope avec lequel il put observer les bactéries. On l’a appelé le “père de la microscopie”. L. Pasteur, 1822-1895, chimiste français. Il inventa la méthode du traitement thermique appelée maintenant pasteurisation. R. Koch, 1843-1910, médecin allemand et Prix Nobel de médecine 1905. Il découvrit les bactéries pathogènes (qui donnent des maladies)

électrophorèse, transformation, LacZ, bactérie, phage lambda. Résumé : L’ADN peut faire l’objet de multiples travaux. Ici notre objectif est de cloner des morceaux de l’ADN du phage lambda dans le vecteur (plasmide) pBluescript. Pour se faire nous aurons recours à différentes techniques comme la digestion enzymatique (de l’ADN du phage ainsi que du plasmide), l’électrophorèse sur gel d’agarose, la transformation (par choc thermique) pour l’introduction des plasmides dans les bactéries, la centrifugation

Connaître le rôle des bactéries lactiques lors de la fabrication du yaourt et observer les différences avec le lait et prouver qu’elles sont à l’origine de transformations (biologique, chimique et physique). III) Résultats. -On observe que de la condensation c’est formée sur les bords du pot de yaourt lors de la fabrication. -On observe également que le lait avec ajout de ferments lactiques se solidifie (devient visqueux) alors que le lait sans ajout de bactéries reste liquide. -On remarque

Gants latex 2 Travaux pratiques pipetteman eppendorf 3 Objectif du TP Cloner des morceaux de l’ADN du phage lambda dans le vecteur (plasmide) pBluesscript 4 Phages: Virus pour bactérie Le bactériophage lambda est un virus d'E. coli 5 Phages: Virus pour bactérie 6 Génome du phage lambda Le phage lambda possède au niveau de sa tête un génome de sous forme d'ADN double brin linéaire de 48,5kb 7 Objectif du TP Cloner des morceaux de l’ADN du phage

appelées pneumocoques sont des bactéries sphériques Gram +, regroupées par paire et possédant une capsule. Il existe plusieurs souches de pneumocoques dont certaines sont inoffensives. Pour ses recherches, Griffith utilisait deux souches appelées « souche S » et « souche R » qui ont des caractéristiques différentes. En culture, sur boîte gélosée, la « souche S » a un aspect lisse. Ces bactéries possèdent une capsule et sont pathogènes car la capsule protège la bactérie des attaques du système immunitaire

pGLO bacterial transformation kit Protocole de transformation bactérienne La souche bactérienne E.coli HB101 a été sélectionnée en vue d’une transformation efficace et sécurisée : naturellement non pathogène, sa résistance aux défenses immunitaires humaines ont été encore diminuées ses composants de surface et son équipement enzymatique favorisent l’adhésion, la conservation et l’expression du plasmide dépourvue de plasmides naturels, elle ne peut pas, non plus, après transformation, échanger le