Trypsine

Etude cinétique de la trypsine I. But Le but de ce TP est de déterminer les paramètres cinétiques de la trypsine : * Le KM qui correspond à la constante de Michaelis ; * La Vmax qui correspond à la vitesse maximale et ; * v, la vitesse initiale. II. Principe La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines. La trypsine est une endoprotéase qui hydrolyse les liaisons peptidiques dans lesquelles un acide aminé basique, la

glucagon liberre est grand TRYPSINE: La trypsine est une endoprotéase qui hydrolyse les liaisons peptidiques dans lesquelles un acide aminé basique (Lys, Arg) engage sa fonction acide. La trypsine est une enzyme du suc pancréatique. Elle est synthétisée sous forme de trypsinogène (proenzyme inactive) puis stockée dans les vésicules enzymatiques des cellules acineuses, d’où elle est excrétée au moment de la digestion. L’activation du trypsinogène en trypsine est le résultat de l’hydrolyse

duodénum sous influence d’entérokinase ; cette enzyme active sélectivement la trypsinogène en trypsine qui va ; à son tour ; activer un certain nombre d’enzymes pancréatiques. Ce système d’activation de zymogènes ; associé à l’existence d’un peptide inhibiteur de trypsine ; forme un mécanisme adapté empêchant la production d’enzymes actives dans la glande pancréatique. 1- Les protéases : a- La trypsine : est la plus abondante (20% des protéines pancréatiques) ; activée à partir du trypsinogène par

ETUDE CINETIQUE DE LA TRYPSINE I.BUT : Le but de ce TP est de déterminer les paramètres cinétiques de la Trypsine. Tout d’abord, en étudiant la vitesse de la réaction au cours du temps puis en étudiant l’influence de la concentration d’enzyme et de substrat sur la cinétique enzymatique de la Trypsine. II.PRINCIPE : La trypsine est une enzyme digestive du suc pancréatique qui a pour but de digérer les protéines. C’est une endonucléase qui hydrolyse les liaisons peptidiques

la libération de la PZ-CCK -PZ-CCK : favorise la sécrétion de la bile et du suc pancréatique -Lipides sont les derniers à sortir de l’estomac => sous forme d’une émulsion grossière instable | PANCRÉAS | -Enzymes protéolytiques sécrétées : la trypsine, la chymotrypsine et l’élastase qui vont hydrolyser les liaisons peptidiques. Elles coupent en C-terminal certains acides aminés comme les AA basiques -Protéines deviennent des oligopeptides etyotéines deviennent des p cytoplasmique l'i ou tri-peptidesions

ETUDE CINETIQUE DE LA TRYPSINE I) But La finalité de ce TP est d’étudier les caractéristiques cinétiques d’une enzyme digestive des protéines, la trypsine. Pour cela, on chercher à déterminer la valeur de Vm, de KM ainsi que du kcat. II) Principe Pour déterminer ces différents paramètres, nous allons faire deux expériences distinctes incluant un dosage spectrophotométrique : dans la première, nous allons faire varier la concentration en enzyme et, dans la seconde, la concentration en substrat

Matériel utilisé- Matériel biologique : trois huîtres creuse- Broyeur ou Homogénéiseur de Dounce- Broyeur ou Homogénéiseur de Dounce- Tube à fond conique (50ml)- Hotte à flux laminaire- Trypsine-EDTA- Boîte de Pétri stérile- Liquide de Dakin- Boite de culture- Milieu de culture EMF/L15/ABEMF : Eau de Mer Filtrée L15 : Sérum de Veau Fœtal AB : Antibiotique- Centrifugeuse- Brosse à

scientifique. Il s'agit ici d'analyser des expériences afin de prévoir leur résultat, en utilisant les connaissances sur les enzymes. L'enzyme présentée en exemple est la trypsine, dont le rôle est de digérer les protéines au niveau de l'intestin, c'est-à-dire en milieu basique. Huit expériences proposent une digestion en présence de trypsine, d'une durée de 30 minutes, mais dans des conditions de températures et de pH variables. Voici les résultats prévisibles : Tube n°1 : même composition qu'à t0. → pas

Préparation de rétrovirus MSCV concentré dans des cellules Eco-Phoenix. Date : 02.04.2014 Culture Eco-Phoenix. Matériel PBS 1X sterile DMEM (4,5g/l glucose) + 10% FCS i 407 + 1 mM PyrNa + PS Trypsine diluée 1. Aspirer le milieu de culture et laver les cellules au PBS. 2. Ajouter 1 mL de trypsine diluée pour une T75 et incuber 5 min à 37 °C. 3. Decoller les cellules en tappant sur le bord de la boite. 4. Ajouter 9mL de milieu et rincer la surface de la boite 2-3 fois. 5. Recuperer les cellules

chimique mastication c'est de la digestion mécanique nucléase et protéase ça c'est évidemment chimique 3.Voyez-vous un effet de la quantité de trypsine sur l’amplitude de la digestion? Expliquez ce résultat. Alors évident la réponse c'est oui donc est-ce qu'il y a une différence donc la réponse c'est oui pourquoi parce que plus il y a d'enzymes plus il y a de trypsine plus vous allez digérer les protéines en acides aminés4.Pourquoi est-il important d’utiliser de la pancréatine activée (plutôt que brute)