TECHNIQUES DE
FRACTIONNEMENTS
Centrifugation, ultracentrifugation et
Sédimentation
Jeudi 6 Octobre 2011

Professeur SAALAOUI Ennouamane, STE+ SVI S5: 2011/2012

Principe
• Méthode qui permet de séparer les particules d’un solvant.
• En biologie, il s’agit des composants cellulaires
(fractionnement cellulaire)
• Le sang avec de l’héparine contient des éléments qui sédimentent au fond du tube
• C’est régi par la force (pesanteur)
• La loi F = m.g où g est l’accélération due à la pesanteur
• La seconde force de friction : loi de Stocks

f’ = 6 . p.n .r .v
Professeur SAALAOUI Ennouamane, STE+ SVI S5: 2011/2012

Principe schématisé f’ = 6 . p.n .r .v

F = m.g

Professeur SAALAOUI Ennouamane, STE+ SVI S5: 2011/2012

La force de friction
• f’ = 6 . P .n .r .v n La viscosité , l’unité c’est la poise ou le poiseuille • r le rayon de la particule
• V la vitesse de la particule
• Le ficoll augmente la viscosité, donc ralentit la sédimentation
• Jouer sur l’accélération due à la pesanteur en augmentant la vitesse de rotation
Professeur SAALAOUI Ennouamane, STE+ SVI S5: 2011/2012

swinging buckets

Les rotors

Ce sont des blocs de métal
(aluminium, titane) avec des puits creusés à l'intérieur et inclinés avec un certain angle par rapport à l'horizontale, généralement de l'ordre de 15° à 35° selon les modèles Professeur SAALAOUI Ennouamane, STE+ SVI S5: 2011/2012

Professeur SAALAOUI Ennouamane, STE+ SVI S5: 2011/2012

L’accélération par rotation
• F = m . g = m . w2 .x
• x : distance qui sépare l’axe du rotor du fond du tube de centrifugation. w est la vitesse de rotation angulaire du rotor w = 2 p n/60 n: Nombre de tours par minute du rotor

Professeur SAALAOUI Ennouamane, STE+ SVI S5: 2011/2012

w

F = m . g = m . w2 .x w = 2 p n/60

O
F

X

g = (2 p n/60) 2 .x

On dit qu’on fait une centrifugation à y rpm avec le rotor z qui se caractérise avec son rayon équivalent de x dans la formule
La règle générale: donner l’accélération en Nombre de g
Ng = (2 p n/60) 2 .x
9.81