CHAPITRE VII
LE GENIE GENETIQUE
ET LES
BIOTECHNOLOGIES

INTRODUCTION
Techniques de l’ADN recombinant : transfert de gènes d’un O* à un autre  2 applications importantes:  Production de protéines biologiquement utiles
(protéines utilisées comme médicaments
-Tab1- protéines utilisées en industrie -Tab2 Création des O* (Vg*, A*, µO*) ayant des caractéristiques modifiées

I- EXPRESSION DES PROTEINES RECOMBINANTES
 Nécessite l’utilisation de vecteurs spécialisés = vecteurs d’expression (séquences d’ADN signaux qui gouvernent la transcription et la traduction de la séquence par la ¢ hôte)
 Les ¢ hôtes (B*, levures, ¢ Vg*, ¢ A*)
 La technologie de l’ADN recombinant permet de produire des formes variantes de protéines naturelles. On parle du génie de protéines

II- SYSTEMES D’EXPRESSION BACTERIEN
 Les 1ers systèmes d’expression de protéines→ B* comme ¢ hôte.
 E. coli permet de produire des protéines rapidement et à faible cout
 Caractéristiques des systèmes bactériens
 Un promoteur en amont de la séquence clonée →?
NB: sélection d’un promoteur qui se fixe fortement à l’ARNpol →?
 Un signal de terminaison de la transcription en aval de la séquence clonée
 Un site de fixation au ribosome en aval du start site de la transcription
NB: la force de fixation au ribosome → ?
 La séquence d’ADN clonée doit avoir un codon d’initiation AUG au début et un codon de terminaison à la fin (ORF)

III- SYSTEMES D’EXPRESSION EUCARYOTES
 Bien que de nombreuses protéines eucaryotes puissent être exprimés avec succès ds des systèmes bactériens →certaines protéines exprimées sont instables ou biologiquement inactives (?)
 Des systèmes d’expression eucaryotes ont été dvpés →produire des versions de protéines ressemblant d’avantage à la forme native
 Propriétés des vecteurs d’expression eucaryote équivalentes à celles de leurs homologues procaryotes en plus de caractères supplémentaires
(séquences signaux de polyadenylation)
 Ex : vecteur navette
 ¢ hôte ( levure,¢