AT 5 : Dosage et détection des gliadines dans un aliment pour bébé

I- Dosage immuno-enzymatique des gliadines
1.3- Compte-rendu

1.3.1 a) Schéma de la méthde mise en œuvre sans ce dosage :

b) La SAB a pour rôle « d'anticorps » car elle permet de faire réagir les gliadines avec elles pour permettre de les dénombrer quantitativement.

c) Une phase hétérogène est une phases composé de plusieurs phases qui ne se solubilise pas. Microplaque sensibilisé signifie que le plaque utilisée est composé d'un dépôt (ici ce sont des Ag)

d) le premier lavage permet d'enlever l'excès de gliadine préalablement déposé. Le second lavage permet d'enlever l'excès de SAB (c'est a dire les molécules qui ne se sont pas fixé au gliadines.) le troisième lavage permet d'enlever sois l'exès de conjugué.

e) voir annexe.

1-3.2) tableau

Colonne1
[Gliadines]
Abs
Abs2
% d'inhibition log [Gliadines]
D1
100
0,289
0,479
81,92
2
E1
50
0,309
0,55
79,24
1,70
F1
25
0,321
0,931
64,85
1,40
G1
12,5
0,39
1,184
55,3
1,10
H1
6,25
0,04
1,454
45,11
0,80
A2
3,13
0,432
1,719
35,11
0,50
B2
1,56
0,394
2,157
18,57
0,19
C2
0,78
0,488
2,175
17,89
-0,11
D2
0,39
0,399
2,334
11,89
-0,41
E2
0,2
0,497
2,36
10,91
-0,70
F2
0,1
0,513
2,601
1,81
-1
G2

0,379
1,218
54,02 H2 0,365
1,228
53,64 A1 0,08
0
0,9 B1 0,219
0,03
0,92 C1 0,554
2,649

b) Graphique → % d'inhibition = f(log de la concentration en gliadines)

c) calcul de la concentration en gliadines dans l'échantillon G :

E1 → y = 28,298x + 24,365 54,02 = 28,298x + 24,365 x = 24,365 – 54,02 / 28,298 x = 0,9
E2 → x = 0,92

d) Il faut divisé par 10 le resultats pour avoir un résultat en ug/ml donc :
Il y as environs 0,091 g de gliadines/ml d'échantillon.

e) Il y a