compte rendu analyses microbiologiques du lait
I. But du tp
Le but du TP est de faire une comparaison de la qualité microbiologique entre deux types de lait :
Le lait 1 : lait pasteurisé ; DLC correcte ; rupture de chaîne de froide
Le lait 2 : lait pasteurisé ; DLC correcte
II. Principe du tp
On a préparé deux solutions mères (10-1) de deux laits différents dans des erlenmeyers. On a ensuite, à partir de ces solutions, fait des 6 dilutions au dixième pour le lait 1 et 4 dilutions au dixième pour le lait 2 dans de l’eau peptonée.
On a par la suite ensemencé chacune de ces solutions dans des milieux différents pour pouvoir dénombrer différents microorganismes : la flore totale (PCA), les coliformes totaux (VRBL), les coliformes thermo tolérants (VRBL), Staphylococcus aureus (Braid Parker) et Echerichia Coli (EMB) Pour finir, on a placé sous incubation ces milieux pour faire la lecture ensuite.
III. Mode opératoire
Préparation des différents milieux
On a utilisé 5 milieux différents qui sont les suivants :
La gélose VRBL : elle permet de dénombrer les coliformes totaux et les thermotolérants. Pour la préparer, on a versé de poudre dans 300 mL d’eau pour la couche supérieure et pour la couche inférieure on a versé de poudre dans 250 mL d’eau. On met ensuite sous agitation magnétique et chauffage jusqu’à ce qu’il y ait ébullition. On la place au four avant son utilisation
La gélose PCA : elle permet de dénombrer la flore totale aérobie. Pour la préparer, on a versé de poudre dans 300 mL d’eau distillée. On met cette solution sous agitation magnétique et chauffage jusqu’à ébullition puis on la place à l’autoclave pendant 1 à 2h avant de l’utiliser
La gélose EMB : elle est dejà prête et permet de dénombrer les colonies d’Echerichia coli
La gélose Braid Parker et son complément : elle permet de dénombrer les Staphylococcus aureus. On a versé de poudre dans
L’eau peptonée tamponnée stérile permet de réaliser les