Compte rendu Tp biomolécules A :
Extraction des lipides du jaune d'oeuf

I- But.

Tout d’abord, le but principal de ce TP est de définir la composition lipidique du jaune d’œuf. Nous allons donc utiliser la technique de la chromatographie sur couche mince , ou CCM, pour cette expérience, nous ne pourrons cependant pas déterminer précisément la quantité de chaque classe de lipides contenus au sein du jaune d’œuf. Dans un premier temps, on extrait les lipides du jaune d’œuf en les solubilisant dans un solvant organique que l'on centrifuge afin d'obtenir un surnageant et un dépôt. Nous n'utiliseront pas ce dernier car les lipides se trouvent dans le surnageant, que nous allons utiliser pour la CCM. Dans un deuxième temps on effectuera une première chromatographie permettant de déterminer quels sont les lipides présents dans le jaune d'oeuf grâce à des témoins. Enfin, nous exécuterons une deuxième chromatographie en changeant la polarité de la phase mobile, afin d'obtenir de manière un peu plus précise ce que contient le jaune d'oeuf d'un point de vue lipidique. Cette expérience nous permet donc de séparer tout en caractérisant les lipides contenus dans le jaune d'oeuf.

II – Principes

La chromatographie sur couche mince est une méthode de séparation de mélanges en leurs constituants. Cette méthode se base sur les différences d’affinité des substances (ici témoins et lipides du jaune d'oeuf) envers deux différentes phases, l’une stationnaire, l’autre mobile. La phase stationnaire solide est fixée sur une plaque (ici une plaque de silice), et la phase mobile liquide nommée éluant, est un solvant ou un mélange de solvants plus ou moins polaire. On dépose sur la phase fixe une petite quantité du mélange à séparer, ainsi que des dépôts témoins quand cela est nécessaire, et on met cette phase au contact de la phase mobile. La phase mobile migre de bas en haut, le long de la phase fixe en entraînant les constituants du mélange plus ou moins loin selon leur