TP N°2 : Dosage des sucres réducteurs par le DNS

• But :

- Préparation d’une gamme d’étalonnage en sucre interverti.
- Dosage d’un sucre non réducteur : le saccharose.

• Principe du dosage par le DNS:

Le DNS (3,5-acide dinitrosalicylique) à chaud et en présence de sucres réducteurs développe un produit réduit de couleur rouge-brune l’acide 3-amino-5-nitrosalicylique.
La technique du DNS est un moyen de détermination de la teneur en sucres réducteurs libres présents dans les échantillons à doser. Quant au dosage des sucres totaux, il faut d’abord procéder à une hydrolyse acide des polysaccharides (dans ce cas le saccharose) par l’acide sulfurique (H2SO4) pour qu’ils se transforment en monosaccharides réducteurs.

• Résultats et calculs : ➢ Gamme étalon :

Les résultats obtenus sont notés dans le tableau suivant:

|Tube |0 |1 |2 |3 |4 |5 |
|Volume de solution étalon : 2,5mmol/L (ml) |0 |0,05 |0,1 |0,2 |0,5 |1 |
|DNS (ml) |2 |2 |2 |2 |2 |2 |
|DO (densité optique) |0 |0,091 |0,58 |0,89 |0,97 |1,106 |
|à 540(m | | | | | | |
|Quantité de sucre inverti en |0 |9.61 |19.23 |38.46 |96.15 |192.3 |
|10-6 mole/l | | | | | | |

La courbe d'étalonnage A=F (qte de saccharose).
[pic]

➢ Calculs : Quantité de sucre inverti en mol/l :

Pour un volume de la solution étalon =