Thème : la santé - Sous-thème : les médicaments.

TP 3.

Type d’activité : expérimentale.

Réaliser une chromatographie sur couche mince (C.C.M)

La chromatographie est une technique d’analyse chimique utilisée pour séparer et d’identifier les substances chimiques présentes dans un mélange. Elle nécessite un support comme du papier ou une plaque à chromatographie et une phase liquide appelée éluant.
L'éluant est un solvant pur ou mélange de solvants qui entraîne les espèces à analyser par capillarité, alors que la phase fixe (matériau de la plaque : cellulose ou gel de silice) les retient. Les corps purs migrent plus ou moins vite, ce qui permet leur séparation.

I. Réalisation de la chromatographie :
1. Préparation de la cuve
• Si besoin, préparer le mélange de solvants qui constituera l’éluant, puis en verser dans la cuve à chromatographie afin d'obtenir une hauteur de liquide d'environ 1 cm.
• Boucher la cuve afin d'éviter l'évaporation des solvants.

2. Préparation de la plaque
Attention ! Si la plaque utilisée est une plaque de silice, elle est très fragile. Éviter de la toucher avec les doigts.
• Tracer au crayon gris, à environ 1,5 cm du bord inférieur de la plaque, un trait qui constitue la ligne de dépôt.
• Placer sur cette ligne des marques, régulièrement espacées, dont le nombre est égal à celui des échantillons à déposer.

3. Dépôt des échantillons
• À l'aide d'une pointe fine, déposer les échantillons sur leurs marques respectives. La tache de dépôt ne doit pas dépasser 3 mm, et il faut changer de pique pour chaque échantillon.

4. Élution
• Introduire la plaque verticalement dans la cuve : la ligne de dépôt doit être au-dessus du niveau du solvant. Boucher la cuve.
• Le solvant contenu dans la cuve monte le long de la plaque : c'est l'étape d'élution. Attendre que l'éluant arrive à environ 1 cm du haut de la plaque, puis retirer la plaque et repérer par un trait la hauteur maximale atteinte par l’éluant (c'est la