LE METABOLISME GLUCIDIQUE
I-BUT ET PRINCIPE
Les tests effectués permettent de rechercher la capacité d’un germe à utiliser par voies oxydative et fermentaire un substrat carboné en acidifiant le milieu.
Dans ce cas de figure, les substrats utilisés sont des oses et des dérivés d’oses parmi lesquels on peut citer : le glucose, l’arabinose, le mannitol, le rhamnose, le sorbitol. Leur utilisation conduit à l’acidification du milieu. Cette dernière est relevée par un indicateur de pH.
II-1-MATERIEL UTILISE * Bec bunsen * Pipette pasteur
II-2-PRODUITS
* Mannitol Mobilité Nitrate (MMN) * Kliger Hajna rolland (KH) * Citrate de Simmon * Suspension bactérienne * Bouillon Clark et Lubs (CL)
III-Le milieu Mannitol Mobilité Nitrate
Ce milieu contient du rouge de phénol. a-Technique * Ensemencer le rouge de phénol par piqure centrale * Incuber 24h à 37°C b-Lecture -Si le milieu vire au jaune, on en déduit que le mannitol a été utilisé et on a alors mannitol +
-Si le milieu reste inchangé, on en déduit que le mannitol n’a pas été utilisé et on a mannitol-
IV-Le milieu Kliger Hajna rolland (KH)
Ce milieu contient : du glucose, du lactose, du citrate de fer, du citrate de sodium ainsi qu’un indicateur coloré. Il se présente en culot et en pente.
En anaérobiose, au niveau de la pente, l’utilisation du glucose acidifie le milieu. Mais cette acidification est neutralisée par l’utilisation des protéines rendant le milieu alcalin. a-Technique * Ensemencer le milieu :
-faire des stries au niveau de la pente
-faire une piqure centrale au niveau du culot b-lecture * Si la pente est jaune : lactose + * Si la pente reste rouge : lactose – * si le culot est jaune : glucose + * si le culot reste rouge : glucose –
V-Le milieu Citrate de Simmon (CS)
Ce milieu contient du citrate de sodium et du Bleu de Bromotymol (BBT).
C’est un milieu ayant une coloration verte avec un pH de 7. a-Technique * prélever une colonie