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Techniques d'immunodiffusion d'ouchterlony

998 mots 4 pages
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SOMMAIRE

INTRODUCTION
Réaction de précipitation
Principe de l'Immunodiffusion
Matériel nécessaire Protocole * Préparation des gels * Préparation des puits * Dépôt des solutions et diffusion
Résultats
CONCLUSION

INTRODUCTION :
L'Immunodiffusion double (IDD) a été développée par Ouchterlony et on y réfère souvent dans la littérature en la nommant d'après son inventeur. L'Immunodiffusion consiste à placer dans un puits formé dans un gel d'agarose un antigène (ou un mélange susceptible de le contenir) et un anticorps correspondant (ou un mélange susceptible de le contenir) dans un autre puits.
Réaction de précipitation :
Elles mettent en jeu un antigène soluble.
Un précipité correspond à la formation d’un édifice multimoléculaire résultant de l’union spécifique entre de nombreux antigènes et de nombreux anticorps. L’antigène soluble mis en jeu est généralement une protéine ou un polyoside.
Elles sont : Très spécifiques. Assez peu sensibles. Soumises au phénomène de zone.
Principe de l'immunodiffusion :
Les protéines en général et les immunoglobulines ou les substances antigéniques en particulier, possèdent la propriété de diffuser dans la gélose. Il suffit donc de percer des puits disposés de façon équidistante dans la gélose contenue dans une boîte de Pétri, d'y déposer les substances à tester pour que 24 à 48 h plus tard, les substances se soient rencontrées.
S'il s'avère qu'un sérum contient des anticorps (immunoglobulines) spécifiques d'une des substances antigéniques présentes, il y aura alors formation, à égale distance des deux puits concernés, d'un précipité en forme d'arc correspondant au complexe immun.
Ce test peut donc permettre de vérifier la spécificité d'un anticorps.
Matériel nécessaire : - 1 petite boite de Pétri contenant du gel d’agar
- 1 gabarit de perçage
- 1 emporte-pièce
- 1 marqueur (pour marquer la boîte de Pétri)
- sérum de lapin = S : contenant des

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