BORDES Jeanne
Jeannou.bordes@gmail.com
Groupe 10

Résumé :
L'objectif de ce TP est de cloner des morceaux d'ADN. Ce clonage nous permet d'obtenir le gène demandé ou bien sa protéine en grande quantité. Ce clonage est nécessaire quotidiennement (l'insuline par exemple, utilisée par de nombreuses personnes). Pour réaliser ce clonage moléculaire nous avons réalisés plusieurs étapes importantes telles que la digestion enzymatique, insertion dans un vecteur de clonage (plasmide), électrophorèse, extraction de l'ADN,...

Introduction :
Le clonage est la multiplication en grand nombre d'un gène, d'un organise ou d'une cellule souche. Il est très important de nos jours, en effet il nous permet d'obtenir en grande quantité un gène ou sa protéine. Comme par exemple pour les diabétiques qui nécessitent de l'insuline quotidiennement, le clonage moléculaire leur permet d'en obtenir facilement et a moindre coût.
C'est une expérience dorénavant considérée comme routinière par les laborantins, elle suit un protocole bien précis qui passe par de nombreuses étapes minutieuses comme l'isolement d'un fragment recherché, son insertion, sa multiplication, son extraction,..
Nous allons exposer dans les parties suivantes, les différentes étapes et leur importance.

Résultats : Utilisation d'un vecteur de clonage :
Les bactéries possèdent de petites molécules d'ADN circulaire : les plasmides. Les plasmides ont obligatoirement une origine de réplication, ils peuvent donc se répliquer de manière autonome, ils ont également des séquences courtes reconnues par des enzymes de restriction. Ces séquences permettent l'insertion d'un fragment d'ADN afin de le cloner.
Un vecteur de clonage est une molécule de petite taille qui a la capacité de réaliser la réplication de façon indépendante afin d'isoler un fragment d'ADN, il en existe 3 (plasmide, cosmide, phage). De ce fait le plasmide est donc un excellent vecteur de clonage.
Tout d'abord il faut digérer l'ADN