TUBE n°6
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TP 4 : Microbiologie
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Conjugaison bactérienne

Introduction
La conjugaison est un transfert génétique à sens unique nécessitant un contact grâce aux pilis sexuels entre une bactérie donneuse F+ (qui possède le facteur F) et une bactérie receveuse F-. Elle permet la transmission de plasmides de conjugaison, en l’occurrence le facteur de fertilité F, et son intégration dans le génome de la bactérie réceptrice.
Lors d'une conjugaison entre une bactérie mutante Hfr et une bactérie F-, le transfert va commencer au niveau de l’oriT. Un brin du chromosome de la bactérie Hfr subit une coupure au niveau du facteur F et ce brin d’ADN commence à se répliquer à partir de la coupure, puis ce dernier est transféré dans la bactérie F- par l’intermédiaire d’un pont cytoplasmique. Le transfert des gènes commence 5 minutes après le contact des deux bactéries. De plus le nombre de gènes transférés dépend du temps de contact entre les bactéries Hfr et F-. Il faut environ 100 minutes pour qu’un chromosome pénètre entièrement.
Lors de ce TP nous allons étudier ce transfert en effectuant une conjugaison entre 2 souches d'E. Coli (F- et Hfr).

Résultats 1) Dans un premier temps, nous effectuons la conjugaison entre la souche Hfr et la souche F-. Dans un deuxième temps, nous ensemençons les bactéries dans différents milieux pour étudier leur développement au cours du temps.
Nous n’avons pas tenu compte des boîtes de pétri contenant le galactose car le tapis bactérien formé était très épais.
Dans les boîtes de xylose et de lactose, on observe la présence d’un tapis sous-jacent.

| 5 min | 15 min | 30 min | 45 min | 60 min | 75 min | 100 min | Glucose | Tapis bactérien | Tapis bactérien | Tapis bactérien | Tapis bactérien | Tapis bactérien | Tapis bactérien | Tapis bactérien | Lactose | + | + | ++ | ++ | +++ | ++++ | ++++ | Xylose | - | + | + | + | + | +