ARN polymérase

FACTEURS GÉNÉRAUX DE TRANSCRIPTION ET TRADUCTION CHEZ LES EUCARYOTES Réalisé par : Chargé du module : KASSA Ratiba Mme YAHIAOUI Année universitaire 2012/2013 0 PLAN Introduction I. Transcription chez les eucaryotes o La formation d'un ARN prémessager a) L'initiation de la transcription 1) Le promoteur 2) Le complexe d'initiation 3) Les différentes familles de facteurs de transcription  La famille Hélice-Tour-Hélice  La famille de protéines à doigts de zinc  La famille des facteurs

Généralités 1 Introduction 2 Expression génique et régulation 3 Les petits ARN II Régulation transcriptionnelle 1 Généralités 2 Chez les Procaryotes 3 Chez les Eucaryotes REGULATION DE L’EXPRESSION GENIQUE III Régulation post-transcriptionnelle 1 Généralités 2 Chez les Procaryotes: régulation de la traduction 3 Chez les Eucaryotes: - Maturation et épissage des ARNm chez les Eucaryotes (épissage alternatif) - L’édition des ARN: une autre manière de modifier la séquence d’un ARNm - Transport de l’ARNm

soulignent son importance dans la myogenèse ( Ver Heyen et al 2001. ; Faustino et Cooper 2003 ; Day et Ranum 2005 ; . Ladd et al 2005 ). En plus de l'épissage alternatif, d'autres mécanismes de régulation post-transcriptionnelle tels que l'interférence ARN (ARNi) de la voie jouent un rôle essentiel au cours du développement. Les microARN (miARN ou Mirs) sont une classe d'ARN non codantes présentes dans divers organismes, y compris les plantes, les nématodes, les insectes et les mammifères ( Lee et al

(copie d’ADN en ARN). Lorsqu’elles se divisent, elles doivent doubler leur ADN (copie d’ADN en ADN), afin que les deux nouvelles cellules obtenues soient identiques. 1 11.2 La réplication de l’ADN est semi-conservatoire Chaque brin de l’hélice bicaténaire sert de matrice à la synthèse d’un brin fils. Chaque molécule fille d’ADN contient un brin parental et un brin fils nouvellement synthétisé. molécule parentale molécules filles 1) hélicase 2) polymérase 2 Description

de la nouvelle chaîne dans le sens 5'-3' La synthèse de la nouvelle chaîne d'ADN est réalisée par une ADN polymérase, qui ajoute les nucléotides présents dans le milieu à l'extémité 3'OH d'un nucléotide correctement apparié. La synthèse se fait donc dans le sens 5'-3' : Il est nécessaire que la synthèse se fasse dans le sens 5'-3' : en effet, l'activité correctrice de la polymérase ne peut marcher que dans ce sens. L'activité correctrice consiste à exciser un nucléotide mal apparié qui vient

synthétisé 2 A A G C A Bilan : Au cours de la phase S, la quantité d'ADN double, chaque molécules d'ADN est répliquées en deux molécules filles selon un mécanisme semi-conservatif. En effet chacun des deux brins de l'ADN sert de matrice. L' ADN polymérase va séparer les deux brins matrices et former deux nouveaux brins en incorporant des nucléotides par complémentarité avec les brins d'origines. En absence d'erreur, les deux molécules d'ADN sont identique et possèdent la même séquence de nucléotides

4096 nucléotides). Ces oligonucléotides vont s'hybrider avec le sonde pour une partie d'entre eux. Ces oligonucléotides fixés vont servir d'amorces au fragment de Klenow de l'ADN polymérase I qui va reconstituer l'intégrité des deux fragments en présence de désoxynucléosides triphosphates marqués au 32P. Des ADN polymérases par exemple dérivée du phage T7 sont actuellement les plus utilisées. Marquage en 3' : * avec une ADN pol. : fragment de Klenow, T4 ADN pol., Taq pol., transcriptase reverse

continu et attardé 2°) Les enzymes intervenant au niveau de la fourche de réplication 3°) Synthèse d’ADN par l’ADN polymérase ADN dépendante 4°) Synthèse du brin attardé IV. Le mécanisme de la réplication V. Terminaison de la réplication -bactéries -eucaryotes raccourcissement du brin attardé télomères VI. Erreurs de la réplication et réparation VII. Les ADN polymérases en recherche Modèle de la réplication de l’ADN proposé par Watson et Crick Figure 1 1 The “winding problem”

n’existe pas d’ADN polymerase qui puisse faire la synthèse de 3’ vers 5’, toutes les ADN polymérase font la synthèse de 5’ en 3’, et aucune ne peut amorcer de synthèse de novo, ie sans amorce ADN ou ARN préexistantes. Au niveau du brin 5’3’ la synthèse est continue, il s’agit du brin avancé ou précoce. Au niveau du brin 3’5 ‘ la synthèse se fait également de 5’ en 3’ grâce au fragment d’okasaki d’environ 1000 nucléotides, il s’agit du brin retardé. Il y a une seule ADN polymérase de type III (mais

étapes de la réplication Eucaryotes Procaryotes Déroulement de l’hélice d’ADN Topoisomérase type I et II Hélicase Hélicase Synthèse des amorces ARN PrimaseADN pol ALPHA Polymerase 5’-> 3’ Pas d’activité exonucléasiquePrimaseAllongement de l’ADN ADN pol DELTA Polymérase 5’ -> 3’ Exonucléasique 3’ -> 5’ ADN pol III Polymérase 5’ -> 3’ Activité exonucléase 3’ -> 5’ Destruction des amorces RNAse H ou FLAP endonucléase ADN pol EPSILON même rôle que la DELTA ADN pol