Chromatographie en phase liquide

Première partie : notion de Chromatographie Définition La chromatographie est une technique physique de séparation d'espèces chimiques. L'échantillon contenant une ou plusieurs espèces est entraîné par un courant de phase mobile (liquide, gaz ou fluide supercritique) le long d'une phase stationnaire (papier, gélatine, silice, polymère, silice greffée etc.) ; chaque espèce se déplace à une vitesse propre dépendant de ses caractéristiques et de celles des deux phases. Cette technique d'analyse chimique

Principe La Chromatographie Liquide Haute Pression (ou Haute Performance) permet de séparer, d’identifier et de quantifier un ou plusieurs composés qui peuvent être dissous dans un liquide à des concentrations aussi faibles que l'état de traces (quelques ppm). Les composés à séparer (solutés) sont mis en solution dans un solvant. Ce mélange est introduit dans un solvant (ou éluant), cela représente la phase mobile. Suivant la nature des molécules, elles interagissent plus ou moins avec la phase stationnaire

Généralités Classification selon la nature des phases : – Chromatographie en phase gazeuse : φ mobile gazeuse - φ stationnaire liquide : chromato gaz / liquide - φ stationnaire solide : chromato gaz / solide – Chromatographie en phase liquide : φ mobile liquide - φ stationnaire liquide : chromato liquide / liquide – φ stationnaire solide : chromato liquide / solide Temps mort, temps de rétention : T0 : temps mort : temps entre l'injecteur et le détecteur TR : temps de rétention : caractéristique

SAFI/ HPLC-08 UNIVERSITE HASSAN II – MOHAMMEDIA FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DE MOHAMMEDIA COURS CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE A HAUTE PERFORMANCE (CLHP) HPLC Année Universitaire : 2008 - 2009 DEPARTEMENT DE CHIMIE Pr. SAFI Mohamed 2 LST-TACQ/ Dépt CHIMIE/ Pr. M. SAFI/ HPLC-08 SOMMAIRE I- INTRODUCTION II- PRINCIPE DE BASE DE LA CHROMATOGRAPHIE III- APPEREILLAGE 1) Réservoir de phase mobile et le traitement du solvant 2) Système de pompage 3) Dispositif d'injection de l'échantillon 4) Colonnes

que celui du produit obtenu présentant un groupement OH. 2/ L’analyse IR permet d’effectuer le suivi de la synthèse. Les spectres obtenus pour le réactif et pour le produit sont fournis en annexe. En pratique, les échantillons sont sous forme de liquides purs. - a - Indiquer les manipulations pratiques a effectués pour placer l’échantillon dans un spectrophotomètre IRTF. Quelles précautions faut-il employées ? - b - Que veut dire IRTF ? Indiquer les principaux avantages et inconvénients de ce type

NOTIONS FONDAMENTALES DE CHROMATOGRAPHIE Marie­Paule Bassez http://chemphys.u­strasbg.fr/mpb PLAN 1.  Introduction 2.  Grandeurs chromatographiques 2.1 Rapport de distribution K du soluté       2.2 Thermodynamique de la chromatographie 2.3 Temps de rétention du soluté 2.4 Facteur de rétention 2.5 Facteur de sélectivité ou de séparation 2.6 Courbe de Gauss 2.7 Résolution des pics 2.8 La théorie des plateaux 2.9 La théorie cinétique 2.10 Exemple d'application Bibliographie 1. Introduction

purification incontournable, la chromatographie en phase inversée et vous familiariser avec l’HPLC. Vous devrez comprendre ses caractéristiques (principe), ses intérêts et défauts. La bonne connaissance des propriétés des peptides et de leurs éléments constitutifs, les acides aminés, est à acquérir avant et au cours de ce TP. Méthodes : Vous allez effectuer la digestion protéolytique d’un peptide grâce à la chymotrypsine, analyser en HPLC par chromatographie en phase inversée avec appariement d’ion

page 0 r Jean-Louis CUQ - CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE Professeur Jean-Louis CUQ page 1 r Jean-Louis CUQ - LA CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE TABLE DES MATIERES I. HISTORIQUE 3 II. PRINCIPE DE LA CHROMATOGRAPHIE 4 III. CLASSIFICATION DES METHODES CHROMATOGRAPHIQUES 5 1. Selon la nature des phases 2. Selon la nature des phénomènes mis en jeu 3. Selon la technique mise en jeu IV. THEORIE DE BASE - GRANDEURS FONDAMENTALES Coefficient de distribution 1. Grandeurs de rétention tR, VR, k' 2. Sélectivité

La chromatographie de partage est à présent la plus utilisée avec les techniques de chromatographie en phase liquide à haute performance. Un soluté très soluble dans la phase fixe migrera lentement, ceci est due à la force de rétention. À l'inverse, un soluté peu soluble dans la phase fixe migrera plus vite, ceci est due à la force d'entrainement. Rapport frontal:RF =distance parcourue par le soluté/distance parcourue par le solvant Le rapport frontal se calcule entre 0 et 1 Le soluté qui est très

http://www2.univ-reunion.fr/~briere COURS DE CHROMATOGRAPHIE LIQUIDE Dr Thierry BRIERE - Professeur agrégé – Département de Chimie Université de La Réunion MASTER “VALORISATION DES RESSOURCES NATURELLES” et ESIDAI 3 Ce document est mis à disposition sous un contrat CREATIVE COMMONS Vous pouvez l’utiliser à des fins pédagogiques et NON COMMERCIALES sous certaines réserves dont la citation obligatoire du nom de son auteur et l’adresse http://www2.univ-reunion.fr/~briere de son site d’origine