Fluorochrome

incidente sa taille (Forward SCatter): Petits angles sa granulosit (SideSCatter): 90° 2: L ‘émission de la fluorescence Après marquage par un fluorochrome Schéma d’un cytomètre en flux Laser FSC Miroirs dichroïques PMT SSC PMT FL2 Filtres FL1 PMT Deux familles d’instruments Distributeurs Choix du fluorochromes  L'affinité de l ’anticorps pour le site de la cellule qu’il reconnaît  Facilité de couplage avec le marqueur  Autres marqueurs

l’objet, ce qui donne une image en relief de la surface des objets. d) Les loupes binoculaires, les microscopes à fond noir et à contraste de phase, le MEB utilisent la réflexion. e) La microscopie en fluorescence se fait grâce à la réémission : les fluorochromes réémettent les photons avec une longueur d’onde différente de celle de départ. 2009-2010 Tutorat de Cytologie-Histologie – Séance n° 1 1/4 QCM n°4 A propos de la préparation des objets en microscopie optique, quelles sont les propositions

cellules lymphocytaires. Le double immunomarquage consiste en deux immunofluorescence soit la directe et la indirecte. L’immunofluorescence directe consiste à utilisé un anticorps qui agit contre l’antigène. L’anticorps est alors couplé à un fluorochrome qui fait en sorte que l’immunoglobuline devient fluorescente. Lorsque le complexe antigène-anticorps se forme il est fluorescent cela permet de mieux visualiser le complexe. L’immunofluorescence indirecte c’est lorsque l’anticorps qui est fluorescent

poisson dans une eau complètement aseptisée (stérile). Cordon ombilical : Tige conjonctive contenant les vaisseaux qui relient le fœtus au placenta et lui assurent un apport d'oxygène et d'éléments nutritifs provenant du sang de la mère. Fluorochrome : Un fluorochrome ou fluorophore est une substance chimique capable d'émettre de la lumière de fluorescence après excitation Cytogénétique : Branche de la génétique qui étudie les chromosomes, à l'état normal ou pathologique, à l'aide de techniques cytologiques

des cellules: Un problème se pose en microscopie optique, les cellules sont transparente, ainsi il est difficile de les observer telles quʼelles sont dans notre corps, pour remédier à ce problème on peut utiliser des COLORANTS (solution1) (≠ fluorochromes), mais ils tuent la cellule (utilisation en Histologie plutôt quʼen microscopie). On peut aussi utiliser la MICROSCOPIE EN CONTRASTE DE PHASE (solution2). (On augmente le déphasage des photons traversant lʼéchantillon par rapport aux autres pour

sondes fluorescentes. Les fluorochromes à double excitation et simple émission dont l’exemple typique est le Fura 2 (mesure du calcium), ou le BCF (pH) ; l’utilisation de ces sondes nécessite le passage rapide entre deux longueurs d’ondes d’excitation, par contre, un seul détecteur est utilisé à l’émission. Le rapport des émissions obtenues aux deux longueurs d’ondes d’excitation donne une mesure de la concentration ionique indépendamment des concentrations du fluorochrome ou du “ bleaching ”. Les

Cytométrie en flux : Fluorochromes : ce sont des composés qui lorsqu’ils sont excité par une lumière retournent a l’état de repos en émettant une lumiere de plus faible energie que celle qui la absorbé. Caractérisé par deux spectres : d’excitation(longueur d’onde d’absorption) et d’émission( longueur d’onde d’émission ). Fluorochrome et molécule étudié de doivent pas interagir, pzs de fixation non spécifique sur les cellules, le spectre d’émisssion doit etre dans le visible, la fluorescence doit

Comme la plupart de la lumière excitatrice est transmise par l'échantillon, seulement la lumière réfléchie d'excitation atteint l'objectif avec la lumière émise. Une utilisation courante en biologie est d’appliquer des colorants fluorescents ou fluorochrome à la cellule d’étude afin d'imager une protéine ou une molécule d'intérêt. B) Le Laser : Les traitements au laser est populaire pour des problèmes de peau, calculs rénaux, et les maladies oculaires, ainsi que dans le domaine esthétique, comme

de la cellule dont on veut déterminer l’expression du gène. Cette ARNm va être par après transformer en ADN complémentaire par rétrotranscription et ceux-ci seront par après marquer d’un colorant la Cyanine 3 (fluochrome vert) ou la Cyanine 5 (fluorochrome rouge). Le mélange témoin marqué et traité marqué est versé sur la puce. On y incorpore ensuite les ADNc dans la puce renfermant le mélange témoin, en même temps que l’ADNc étalon. Chaque brin d'ADNc va s'hybrider au brin monocaténaire d'ADN

l’anticorps anti-CD3 et l’anticorps secondaire (marqué par le FITC) est l’anticorps anti-rat couplé à un fluorochrome rhodamine qui reconnait l’anti-CD3. La révélation de la population lymphocytaire B est réalisée par immunofluorescence directe. L’anticorps primaire, couplé au fluorochrome FITC, est l’anticorps anti-IgM. La différence entre ces deux techniques est le placement du fluorochrome, en effet avec la méthode directe on utilise qu’un seul anticorps contre deux pour la méthode indirecte