Paire de bases

MUTATIONS PONCTUELLES  Mutation ponctuelle : modification d’une seule paire de bases dans l’ADN ou d’un petit nombre de paires de bases adjacentes Type de mutations au niveau de l’ADN Conséquences ou résultats au niveau moléculaire CHANGEMENT DE BASES AU NIVEAU DE L’ADN Deux grands types de mutations ponctuelles : 1. Les substitutions de bases : transition et transversion 2. Les insertions ou délétions de bases (INDEL) • TRANSITION : Remplacement d’une base par l’autre base

rentrent en jeux premièrement l’hélicase brise les liaisons hydrogène entre les bases azotées afin de les exposer a l’appariement. Ensuite le primase favorise le déclenchement de l’ajout de nucléotides au brin parental par l’amorce de l’ARN. Prochainement l’ADN polymérase vient et apparient les bases, elle désamorce l’ARN en remplaçant les nucléotides par ceux de l’ADN et elle vérifie et corrige l’appariement des bases. Dernièrement la ligase lie les fragments d’Okazaki ensemble. La structure de l’ADN

taille d'une paire de bases imposées la structure générale de l'ADN, les appariements ne peuvent se faire qu'entre une purine et une pyrimidine. si on rajoute à cela les contraintes imposées par la formation de liaisons hydrogènes, les seules paires de bases possibles sont : Adénine-Thymine : A-T et Guanine-Cytosine : C-G On remarque que la paire C-G est implique 3 liaisons hydrogène contre 2 pour A-T. Un appariement C-G a donc une énergie de dissociation plus grande : 5.5 kcal/paire contre 3.5

phosphate, un sucre et l’une des quatre bases azoté (adénine guanine cytosine et la thymine) NB: en l’absence du groupement phosphate, la base et le désoxyribose forment un nucléoside. Voir figure Structure de la double hélice imaginée par Watson et Crick: Chaque hélice est une chaine de nucléotides par des liaisons phosphodiester Les deux hélices sont maintenues ensembles par des liaisons hydrogènes qui se forment entre les paires de bases. Chaque paire de bases comporte une base purique et une

Les acides désoxyribonucléiques A.D.N. Structure primaire 1. Caractéristique de composition ➢ Ose = 2’désoxyribofuranose ➢ Bases = majeures : Adénine, Guanine, Thymine et Cytosine = désoxyribonucléotides Mineures : dérivés méthylés de A et C 2. Polymérisation nucléotidique Les nucléotides s’associent par des liaisons 3’-5’ phosphodiester pour former des chaînes polynucléotidiques Représentations Conséquences de la polymérisation : • La

composé de deux brins d'ADN complémentaires enroulés l'un autour de l'autre, pour ce motif on dit que l'ADN est bicaténaire Chaque brins est constitué d'un enchaînement antiparallèle de bases, pour ce motif elles sont dites polynucléotidiques: o puriques: guanine et adénine o pyrimidiques: cytosine et thymine Les bases sont liés entre elles par les désoxyriboses (des sucres, oses) et par des acides phosphoriques avec des liaisons hydrogène. L'appariement est spécifique, complémentaire et A +T / G +

coupure et sa circularite . 2) Digestion du plasmide à l'aide des 2 enzymes de restriction2 fragment d 'ADN 3) Digestion du phage Lambda Le phage lambda est un virus à ADN double brin bacteriophage qui infecte la bacterie E.Coli 48 502 paire de bases On obtient 11 fragment du genome de phage lambda apres digestion avec EcorI et HindIII : 1- 24756 bp (EcorI-EcorI) 2- 5148 bp ( EcorI-HindIII ) 3- 4973 bp (EcoRI - HindIII ) 4- 4268 bp (HindIII - EcoRI ) 5- 2027 bp (HindIII

autre Mutation ponctuelle  modification d’une seule paire de bases dans l’ADN ou d’un petit nombre de paires de bases adjacentes Type de mutations au niveau de l’ADN Conséquences ou résultats au niveau moléculaire Les mutations ponctuelles Deux grands types de mutations ponctuelles  1.  Les substitutions de bases 2.  Les insertions ou délétions de bases (INDEL) Substitutions de bases Transitions Transversions Changement de bases au niveau de l’ADN •  TRANSITION  Remplacement

Le complexe multienzymatique est composé d’un tas d’enzyme (les licases, ADN polymérase…) Cet ensemble porte le nom de REPLISOME. ADN (schéma) L’ouverture du duplexe est un mécanisme qui demande beaucoup d’énergie cad qu’a chaque fois qu’une paire de base est dissociée, deux molécules d’ATP sont hydrolysé pour fournir l’énergie nécessaire. Les enzymes responsable de cette hydrolyse sont appelées l’ATPases. (Ex : Quand on a un mécanisme in vivo, on peut le représenter in vitro.) Cet œil

l'activité des enzymes de restriction. Suite à la digestion enzymatique du phage lambda on obtient théoriquement 13 fragments dont les tailles sont répertoriées dans la tableau suivant : (Fig.1) Enzymes de restriction Taille du fragment en paire de bases (pb) Eco RI / Fin du fragment 21226 Eco RI / Hind III 5148 Eco RI / Hind III 4973 Hind III / Eco RI 4268 Début du fragment / Eco RI 3028 Hind III / Hind III 2027 Eco RI / Hind III 1904 Hind III / Eco RI 1584 Eco RI / Hind III