TP Chromatographie
Les conservateurs sont utilisés dans l’industrie alimentaire car ils prolongent la durée de conservation des denrées alimentaires en les protégeant des altérations dues aux microorganismes.
Le but de ce TP est donc de doser deux conservateurs que l’on trouve usuellement dans des boissons de type soda : l’acide sorbique, qui a une action antifongique et l’acide benzoïque qui est supposé cancérigène. L’acide sorbique est autorisé jusqu’à 300mg/L et l’acide benzoïque jusqu’à 150mg/L.
Nous allons doser ces conservateurs par CLHP. SCHÉMA DE L’APPAREIL
PRINCIPE DU DOSAGE
On réalise le dosage de l’acide sorbique et de l’acide benzoïque par CLHP avec une colonne de type C18. La phase mobile est constituée de 75% de tampon acétate à 5mMol.L-1 à pH 4 et de 25% d’acétonitrile. La phase stationnaire de la colonne a une longueur de 150 mm et un diamètre de 4,6 mm. Le diamètre des particules est de 5 microns. La détection des particules est réalisée par un détecteur à barrette de diode.
On effectue des injections de 50µL dans la colonne à l'aide d'une seringue. On injecte de façon à remplir la boucle à débordement. Cette action est effectuée 2 fois afin d'être sûr que la boucle est nettoyée et donc qu'il n'y a que notre échantillon dans la boucle.
Ensuite, nous voulons effectuer la mesure de la quantité d'acide sorbique et d'acide benzoïque dans nos 2 sodas: l'Orangina et le Schweppes. Pour cela, on va préparer une solution de chaque soda. On dégazéifie nos 2 sodas grâce à un bain à ultrasons. On diluera l'Orangina 2 fois. Une fois les 2 sodas dégazéifiés, on filtre nos solutions à l'aide d'une seringue jetable de 1 mL équipé d'un filtre de 0.45 µm. Le tout sera mis dans 2 tubes vial de 2 mL chacun.
On va aussi construire une gamme étalon. On va donc pesé 50 mg de chaque conservateur que l'on dilue dans une fiole jaugée de 50 mL avec 25 mL d'éthanol. On complète jusqu'au trait de jauge avec de l'eau distillée. On obtient ainsi notre