la cytométrie en flux

859 mots 4 pages
La cytométrie en flux
CMF
;

Définitions






Mesure ( -métrie) des propriétés optiques de cellules ( cyto) transportées par un liquide vecteur (flux) jusqu’à une source d’excitation lumineuse.
Mesurer simultanément plusieurs paramètres sur plusieurs milliers de cellules par seconde
Combinaison de système fluidique, optique, informatique et électronique 

moyen utilisé : fluorescence



quantifier et analyser des particules en suspension



Rapidité, spécificité, reproductibilité, beaucoup informations sur même échantillon

Les composants d’un cytomètre
Combinaison de systèmes différents :

Fluidique :

flux laminaire, passage des cellules une à une devant le laser
Séparation et alignement des particules , tri, vitesse d’analyse et de tri

Optique :

laser , diodes , miroirs dichroïques, filtres, détecteurs
Source(s) lumineuses , sélection spectrale des longueurs d’ondes

Electronique

Collection de la lumière émise et transformation des signaux optiques en signaux électroniques
PMT: PhotoMultiplicaTeur => amplification de la lumière émise
Digitaliseur: Transformation signaux électriqies en dignaux numérique
Ordinateur: traitements et stockage des donées grâcee au logiciel

Analyse des données:

Affichage et analyse des données,
Analyses multivariées
Identification et quantifiaction des populations

La composante fluidique




Echantillon= cellules en suspension liquide Liquide vecteur ou de gaine





Echantillon et liquide gaine injectés dans le cytomètre





Eau distillée ou solution saline (PBS) pour analyse
Solution saline pour le tri

Par seringue
Par un système pressurisé

Pas de mélange entre liquide de gaine et échantillon
ECOULEMENT LAMINIARE

Optique - les sources de lumière


Les LASERS








Faisceau d’une seule longueur d’onde ( raie laser)
Raies de quelques milliwatts à plusieurs watts
Peu onéreux ( refroisissement

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