TRAVAUX PRATIQUES DE BIOCHIMIE Les acides nucléiques Objectifs • Extraction et visualisation de l’ADN

Matériel par élève • • • • • • • • Sac à autoclave soudé Entonnoir Eprouvette de 10 mL Gaze adaptée à l’entonnoir Glace pilée 1 tube à essai 1 bécher 1 pipette Pasteur

Réactifs par élève • • • Kiwi mur (1 pour 4 élèves) Ethanol froid à 95% (3 ou 4 mL par élève) Solution d’extraction (20 mL par élève)

Mode opératoire • • • Prélever 20 mL de solution d’extraction dans un bécher. Prendre 6 morceaux de kiwi et les placer dans un sac à autoclave soudé. Ajouter 20 mL de solution d’extraction dans le sac, le fermer en enlevant l’air en le soudant. • Broyer les kiwis minutieusement et prudemment sans briser le sac (pendant 5 minutes) • Rafraîchir le mélange de kiwi dans la glace (1 minute) • Broyer davantage. Les rafraîchir à nouveau. Répéter plusieurs fois cette opération. • Filtrer le broyat sur une gaze et recueillir le filtrat dans un bécher. • Introduire 2 à 3 mL de filtrat dans un tube à essai. • Mesurer 3 à 4 mL d’éthanol à 95% froid dans une éprouvette • Ajouter délicatement et lentement sans agiter, en faisant coulant le liquide le long de la paroi. • Faire remonter dans la phase supérieure l’ADN à l’aide de l’effilure d’une pipette Pasteur. Compte-rendu • Décrire l’aspect de l’ADN et indiquer s’il est soluble dans l’éthanol. Année 2007

Equipe pédagogique Lycée JEAN ANGERS GROSS – POCHET - ROUGNY

TRAVAUX PRATIQUES DE BIOCHIMIE Les acides nucléiques Fiche de préparation

Matériel par élève • • • • • • • • Sac à autoclave soudé ou sac zippé solide Entonnoir Eprouvette de 10 mL Gaze adaptée à l’entonnoir Glace pilée 1 tube à essai 1 bécher 1 pipette Pasteur

Réactifs par élève • • • Kiwi mur (1 pour 4 élèves) Ethanol froid à 95% (3 ou 4 mL par élève) Solution d’extraction (20 mL par élève) : pour 1L - 100 mL de de shampoing doux pour lavage quotidien incolore ou liquide vaisselle - 15g de NaCL - Eau distillée qsp 1L

Matériel par laboratoire • •