TD N°1

Matériels Indispensable au Laboratoire de Bactériologie

La microscopie
La microscopie est un ensemble de techniques permettant d'obtenir une image des structures biologiques. Le microscope optique
Le microscope électronique

1. La microscopie optique
Le premier microscope fut sans doute fabriqué par Hans et Zacharias Janssen, deux fabricants de lentilles néerlandais, en 1590, mais le modèle final fut inventé par
Antoine van Leeuwenhœk en 1664, puis fut amélioré par Christian Huygens.
La microscopie optique regroupe:
Le microscope à fond clair
Le microscope à fond noir
Le microscope à contraste de phase
Le microscope à fluorescence

1-1. La microscopie à fond clair
Utilise des rayons lumineux.
Permet le grossissement de 1500-2000 fois.
Épaisseur de coupe ( 1-5 µm).
Observation vitale et colorée.

Bactérie

Microscope à fond clair

Paramécie

1-2. La microscopie en contraste de phase
Cette technique permet d'observer les cellules sans préparation ni coloration dans leur milieu d'origine.
A l’observation, on voit une image en noir et blanc où les différentes structures apparaissent bordées de blanc d’un côté et de noir de l’autre.

Culture cellulaire

1-3. La microscopie à fond noir
Utilise les rayons lumineux dans un fond noir.

Utilisé pour les éléments trop transparents.

Les éléments observés apparaissent très brillants
( les flagelles, les fibres ).

Bulles d'air dans l'eau

Le microscope à fond noir

1-4. La Microscopie à fluorescence

Consiste à utiliser une coloration fluorescente. Deux colorants très utilisés sont : la rhodamine (émet une lumière rouge) et la fluorescéine (lumière verte).

Culture cellulaire

Le microscope à fluorescence

Legionella pneumophila

2. La microscopie électronique
Il existe deux variantes de la microscopie électronique :
La microscopie à transmission
La microscopie à balayage

Le microscope électronique à transmission

Bactériophage

Le microscope électronique à balayage
Fournis des images en 3D