activitc3a9 3 thc3a8me 1 la phase photochimique
Document 1 : Observation de chloroplastes d’élodées au microscope optique et sa schématisation
Document 2 : Observation de chloroplastes au microscope électronique
Document 3 : Mise en évidence de dégagement de dioxygène par l’élodée en présence de lumière par Exao
Principe : La cuve du bioréacteur est remplie de fragments de feuilles d'élodée en présence d'hygrogénocarbonate de sodium (source de carbone).
On effectue une séquence obscurité / lumière / obscurité, en mesurant la concentration en oxygène du milieu.
Interprétations :
Photosynthèse brute (PB) = dioxygène produit par la photosynthèse
Respiration (R) = dioxygène consommé par la respiration
Photosynthèse nette (PN) = dioxygène produit réellement
PN = PB - valeur absolue (R)
Document 4 : La photolyse de l’eau au niveau thylakoïde des chloroplastes
Document 5 : Extraction de chloroplastes d’épinards
Peser 10 g de limbes de feuilles propres et fraîches d'épinard (2 grandes feuilles) puis découper les limbes en morceaux dans un mortier préalablement placé au réfrigérateur (on évite ainsi une dégradation des enzymes nécessaires aux réactions).
Ajouter 3 mL de tampon tris-saccharose pH = 10,5 et commencer à broyer avec un peu de sable
Ajouter 25 mL de solution tampon phosphate saccharose (pH = 6,5) et continuer à broyer avec un peu de sable pendant au moins 2 minutes.
Filtrer le broyat obtenu sur gaze (3 à 4 épaisseurs) et coton hydrophile afin de recueillir une quantité suffisante de filtrat (presser si nécessaire).
Conserver la solution de chloroplastes à l’obscurité dans un erlenmeyer.
Contrôler au microscope optique la présence de chloroplastes libres et l'absence de cellules foliaires