Le tutorat est gratuit. Toutes reproductions ou vente sont interdites.
Enzymologie : Calculs
Résolution de QCM

Activité enzymatique
• On constate après incubation de 30 minutes, en présence de 0,5 ml d’un sérum dilué 100 fois, une hydrolyse de 150 nmol de paranitrophénylphosphate, substrat de la phosphatase alcaline. L’activité phosphatase alcaline du sérum, exprimée en UI/L de sérum sera :
150 . 10-3 μmol x 100 (dilution !)
AE = ------------------------------------------------ = 1000 UI/L
0,5 . 10-3 L x 30 min
• L’activité d’une enzyme du sérum est de 3500 UI/L. Quelle est, après 30 minutes d’incubation, la quantité de substrat transformé par 0,5 ml de ce sérum dilué au cinquantième ? q μmol x 50 (dilution !)
3500 UI/L = ------------------------------
30 min x 0,0005 L
3500 x 30 x 0,0005 q = ------------------------ = 1,05 μmol = 1050 nmol
50
• Le dosage de l’activité alanine aminotransférase du sérum d’un patient donne comme résultat à 37°C, 500 UI/L de sérum. Quel est à 37°C, le temps d’incubation nécessaire pour que 2,5 mL de sérum du patient transforme 1,35 mg d’alanine ? poids moléculaire de l’alanine : 90
(1,35 x 103/ 90) μmol
500 UI/L = --------------------------------- t min x 2,5 x 10-3 L
( 1,35 x 103/ 90) t = ------------------------- = 12 min
500 x 2,5 x 10-3
Formules
Vi = k2 [Et] (en phase stationnaire)
Vm [S]
V = -----------
Km + [S]
Présence d’un inhibiteur compétitif : K’m = Km (1+ [I]/Ki)
Présence d’un inhibiteur non compétitif : V’m = Vm /(1+[I]/Ki)
UI = μmol substrat/min
Katal = mol substrat/sec
AMS = mol substrat / (mol d’enz x sec) = k2
AS = AE / prot (mg)
Facteur de purification = ASf/ASi

attention aux unités !!!

attention aux dilutions !!! AEf = AEi x Vi/Vf (Vi/Vf = facteur de dilution ex : dilution 1/50) le plus souvent on veut retrouver l’AE initiale, après avoir fait les mesures sur la solution diluée :
AEi = AEf x Vf/Vi ex : pour la dilution au 1/50e : AEi = AEf x