Compte rendu TP de CEG

I -Activité transactivatrice de ER dans le système de levures transformées.

L’objectif de cette manipulation est d’étudier le mode d’activation en fonction de différents traitements hormonaux de la transcription du gène LacZ chez deux souches de levures, l’une possédant le récepteur à l’oestradiol humain (WT-1) et l’autre témoin (BJ-ECZ).

Fig1 : Etude de l’activité β-galactosidase en fonction de différents traitements hormonaux à une concentration de 10-7M

Légende :

etOH1 : souche BJ-ECZ traitée à l’éthanol etOH2 : souche WT-1 traitée à l’éthanol
E2 : souche WT-1 traitée à l’oestradiol
DEXA : souche WT-1 traitée à la dexaméthasone
P : souche WT-1 à la progestérone
DES : souche WT-1 au diéthylsillbestrol
Tx : souche WT-1 au 4-hydroxyTamoxifen
E3 : souche WT-1 à l’estriol

L’activité β-galactosidase observée est le reflet de l’activité transcriptionelle.
Nous n’observons aucune activité β-galactosidase pour la souche BJ-ECZ traitée à l’éthanol. En effet cette souche de levure ne possède pas le récepteur à l’oestradiol humain (hER).
Il en est de même pour la souche WT-1 mais celle ci au contraire possède hER.
On peut en conclure que l’éthanol n’est pas un facteur de transcription efficace, ils peuvent être considérés comme des contrôles négatifs.

Concernant le traitement E2 nous observons une activité β-galactosidase importante de 0,139 U (unité de Miller). L’œstradiol a une forte affinité pour le recepteur hER, et induit ainsi une transcription.
Il en est de même pour le traitement au DES. On a une activité β-galactosidase de 0,156 U (unité de Miller). Le DES a une affinité pour hER et induit aussi une activité transcriptionelle. Le DES est un agoniste de l’œstradiol.
Pour E3 on observe une activité β-galactosidase deux fois moins importante qu’avec un traitement à l’œstradiol. E3 est un ligand ayant une affinité moindre pour le recepteur hER comparé à l’œstradiol.

Concernant les traitements aux DEXA,