Explication des calculs éléctides

705 mots 3 pages
Explication des calculs : TP Etude d’une enzyme : la β-galactosidase I. Etudiant 1 uniquement · Concentration en ONP pour la gamme étalonLa concentration en orthonitrophénol (soit la concentration finale) peut être déterminée grâce à la solution mère dont on connait sa concentration mais également par le volume final et initial.Ainsi, Avec : [ONP] : M = mol/L VONP : volume ONP ajouté en mL Vtot : Volume total en mL …afficher plus de contenu…

Il s’agit de la courbe des absorbances à 420nm en fonction de la concentration molaire.Il est obtenu une équation de droite de type : y = aX car b = 0Avec l’équation de Beer-Lambert : Absorbance = ε x [ONP]Ainsi : ε = Avec : ε : coefficient d’atténuation [ONP] : Concentration en ONP en mol/LC’est donc : = 4610 soit environ 4670 sur excel II. Influence de la concentration en β-galactosidase (Etudiant 2) · Concentration en β-galactosidase Concentration en β-galactosidase = = Avec : [β-galactosidase ] mère : concentration en β-galactosidase : g/L [β-galactosidase] mère : Concentration en β-galactosidase mère Vβ-galactosidase : Volume de β-galactosidase ajouté en mL Vtot : Volume totalExemple pour un volume d’enzyme de 0,02 mL : Concentration en β-galactosidase = = 0,00125 …afficher plus de contenu…

Vitesse de transformation de l’enzyme, influence pH et température (étudiants 2, 3, 9 et 10) · Concentration en ONPGPour t = 0[ONP]0 = Avec : [ONPG]mère : Concentration initiale en ONPG en MM VONPG : Volume ajouté d’ONPG en mL Vtotal : Volume total en mLPour t > 0[ONP]t = – [ONP]tAvec : t : temps d’incubation en minExemple pour un t = 0 et t=1 :[ONP]0 = = 0,625 mM[ONP]1 = - 0,2257= 0,3993Mm · Vitesse en UI et nkatVinit = Vinitnkat = Vinit x 16,67Avec : [ONP] : Concentration en ONP en mM Vtotal : Volume total en mL T : temps en min 10-3 : Conversion en L 1 000 : Conversion en μmol 1UI = 1 μmol/minExemple étudiant 2 : Vinit = = 0,902 UIVinitnkat = 0,902 x 16,67 = 15,05

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