TP BIOCH0601 L3 SPS - BCHDOSAGES DE LA CREATININE & ET DE L’UREE DANS DES ECHANTILLONS DE SERUM DE D’URINE DE PATIENTS SAINS ET MALADESEnseignantsAmar Bennasroune Jessica Thevenard-Devy
Détermination de la créatinine sanguine et urinaireRappels sur le métabolismeLe foie synthétise la créatine à partir de 3 acides aminés : l’arginine, la glycine et la méthionine. Cette créatine est ensuite libérée dans la circulation et captée par le muscle. Dans les muscles la …afficher plus de contenu…

Transférer : · 100 µL de chaque tube de la gamme dans une série de cuves numérotées de 0 à 3, · 100 µL de plasma 1 et 2 dans des cuves marquées P1 et P2 (faire en triplica)Juste avant de lire les absorbancesAjouter 1 ml de réactif picrosodique dans chaque cuveAGITER (à l’aide de la P1000)Attendre 30 secondes et lire l’Absorbance à 500 nm (ne pas oublier de faire le zéro) : T0A T= 5 minutes, lire à nouveau l’absorbance de toutes les cuves RESULTATSRecopier les absorbances lues pour les différentes cuves : DA = A5min – A30 secSur papier millimétré, tracer la courbe d’étalonnage : DO = f [créatinine]En déduire les concentrations en créatinine des 2 échantillons de plasma En fonctions des valeurs normales de créatininémie et des valeurs obtenues pour vos échantillons, tirez les conclusions adéquates sur les analyses biochimiques des échantillons des …afficher plus de contenu…

Rincer le flacon R2 avec le flacon R1 plusieurs fois.CODE 82521 : Verser 300 µL du flacon R2 (Uréase) dans un flacon R1 (Salicylate).Mélanger par retournements lents. Porter à température ambiante.Macrométhode : Diluer le flacon R3 (Réactif alcalin) au ¼ avec de l’eau distillée (1 vol. + 3 vol.)ECHANTILLONSPlasma n°1Plasma n°2Urine (à diluer au 1/50)VALEURS USUELLESSérumUrineUREEBUNUREEBUN0.10 à 0.50 g/L4.7 à 23.3 mg/dl20 à 35 g/24h9.3 à 16.3 g/24h1.7 à 8.3 mmol/L1.7 à 8.3 mmol/L333 à 583 mmol/L333 à 583 mmol/LSearcy et al., 1967.MODE OPERATOIREFaire les dosages en triplicaMesurer dans des tubes à essaisDosageEtalonBlancEchantillon5 µLEtalon5 µLEau distillée5 µLSalicylate + uréase1 mL1 mL1 mLMélanger. Laisser 4 minutes à température ambianteRéactif alcalin1 mL1 mL1 mLMélanger. Laisser 8 minutes à température