TP lipides : extraction des lipides du jaune d'oeuf
I. But
Le but de ce TP est d’identifier la composition lipidique du jaune d’œuf. Pour cela nous avons réalisé trois manipulations : dans un premier temps, nous avons procédé à une extraction des lipides du jaune d’œuf et dans un deuxième temps, deux chromatographies sur couche mince afin d’identifier les différents lipides du jaune d’œuf, mais avec deux solvants de polarité différente. Après une analyse des deux chromatographies et une comparaison des rapports frontaux, on connaîtra l’identité des lipides du jaune d’œuf.
II. Principe
Pour la première étape, le principe de l’extraction repose sur une propriété physico-chimique : la différence de solubilité des lipides. En effet, les lipides étant solubles dans les solvants organiques, ce sont des molécules hydrophobes : il faut donc utiliser un solvant organique apolaire pour solubiliser les lipides. Les autres constituants du jaune d’œuf, comme les protéines, sont des molécules plutôt hydrophiles (polaires) : elles ne vont pas solubiliser. C’est donc en utilisant un solvant polaire (comme le solvant composé de chloroforme et méthanol) que l’on va pouvoir obtenir une séparation des autres molécules constituantes, qui seront solubles dans ce solvant, avec les lipides non solubilisés qui vont se retrouver dans le surnageant. C’est le produit de cette extraction que l’on va utiliser pour la chromatographie.
Pour la seconde étape, on réalise la chromatographie sur couche mince : c’est une méthode physique de séparation de mélanges. C’est le principe d’absorption, se basant sur les différences d’affinités des lipides avec le solvant. Cette méthode nécessite deux phases :
Une phase mobile liquide nommée éluant est un solvant, ou un mélange de solvant, qui peut être apolaire ou polaire.
Une phase stationnaire qui, dans ce TP, est une plaque de gel de silice. Sur cette plaque, les molécules migrent le long, emportées par le solvant.
La polarité des deux