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extraction et évaluation de l’activité antioxydante de polyphénols

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Microsoft Word - Document9TP UE4S3 : EXTRACTION
ET SEPARATION DE
BIOMOLECULES

Extraction et évaluation de l’activité́ antioxydante de polyphénols
LICENCE 2 SCIENCES POUR LA SANTÉ – TD1A 2022-2023
AMAOUCHE YANIS (41001940)
PROCHASSON ANJARA (41004542)

Objectifs :
1. Dosage des polyphénols totaux contenus dans 2 plantes médicinales utilisées traditionnellement à la Réunion et inscrites à la pharmacopée française :
Hypericum lanceolatum et Dodonaea viscosa.
2. Évaluation de la capacité …afficher plus de contenu…

La « Macération » est une méthode d’extraction Solide-Liquide très utilisée lors de l’extraction de composés végétaux, elle consiste à laisser le matériel végétal (broyé au préalable) en contact prolongé avec un solvant pour en extraire les principes actifs. C’est une extraction qui se fait à̀ température ambiante et qui a l’avantage de préserver les substances thermosensibles qui pourrait au travers d’une hausse de température se dégrader et d’éviter le dégagement d’espèces chimiques volatiles dans l’air et donc la perte de celle-ci.
Cela en fait donc une technique plus simple et moins couteuse. Protocole : 1. Laver les feuilles puis les …afficher plus de contenu…

Étant une méthode colorimétrique cette réaction produit une coloration « bleu » dont l’absorption maximale est comprise entre entre 725 et 750 nm est proportionnelle à la quantité́ de polyphénols présents dans les extraits végétaux

Matériel nécessaire : Eau ; réactif de Folin- Cobalteux ; Solution de Na2CO3 ; acide gallique (polyphénol de référence) ; Plaque 96 puits Protocole : 1. Réaliser une gamme étalon d’acide gallique (témoin) en 8 points. (L’utilisation de l’acide gallique qui est un des acides phénoliques les plus présents permet d’avoir un polyphénol témoin) Annexe A
2. Introduire les étalons dans des Eppendorf de 2mL. Annexe B
3. Prélever 25µL par étalon et l’introduire dans un puit (n=3) puis ajouter

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