Embryo
Glenda Comai
PostDoc - Laboratoire du Dr Andreas Schedl Centre de Biochimie comai@unice.fr
La transgenèse chez la souris
Partie 1 Souris transgénique classique = transgenèse additive
Partie 2 Souris transgéniques par recombinaison homologue
Qu’est-ce que la transgenèse?
Animal transgénique: animal dont le génome a été modifié ! soit par l’addition de nouvelles séquences d’ADN dans son génome avec une intégration aléatoire " Trangenèse classique ! soit par la modification de séquences déjà présentes dans son génome (knock-out, knock-in) " Trangenèse par recombinaison homologue
Ces modifications doivent être transmissibles par la lignée germinale d’une génération à l’autre.
Pourquoi la transgenèse?
Permet d’étudier la fonction des gènes -développement embryonnaire -organogenèse -pathologies humaines
http://www.hhmi.org/biointeractive/media/transgenic_mice-sm.mov
La nouvelle génétique expérimentale • Génomique fonctionnelle: étude de la fonction par la dysfonction • Validation d’une hypothèse: gène ou mutation candidate • Créer un modèle expérimental de maladie humaine – Etudier les mécanismes physiopathogéniques de la maladie – Tester des stratégies thérapeutiques (élaboration et validation préclinique)
Le développement de l’embryon en phase de pré-implantation: du zygote au blastocyste
Fecondation
Pronucleus
Le développement de l’embryon de souris
Transgenèse classique
Transgenèse par recombinaison homologue
Partie 1 Souris transgénique classique ou additive: intégration aléatoire du transgène dans le génome hôte ! Principes ! Applications sur-expression d’un gène expression ectopique d’un gène analyse des régions régulatrices d’expression des gènes « rescues »
! Système inductible d’expression du transgène (tet-ON, tet-OFF) Système conditionnel d’expression du transgène (CRE-loxP) Approches siRNA (ou shRNA)
partie 1 Souris transgénique classique 1-PRINCIPES