BCH2001L Biochimie Expérimentale 1BCH2001L Biochimie Expérimentale 1
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1 PPrroottooccoolleess ddee TTrraavvaauuxx PPrraattiiqquueess

TP 1. Séparation de l'alanine et de l'arginine sur résine échangeuse d'ions TP 2. Spécificité des actions enzymatiques : les glycosidases TP 3. Extraction de l'albumine d'un sérum par chromatographie d'affinité TP 4. Structure d’un dipeptide et mise en évidence …afficher plus de contenu…

Les oses obtenus, après hydrolyse enzymatique, seront identifiés par chromatographie sur couche mince par comparaison avec des témoins.
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3. MODE OPERATOIRE
3.1. Hydrolyse enzymatique
Les hydrolyses enzymatiques sont réalisées au pH d'activité optimale des enzymes comme il est indiqué dans le tableau ci-après.
Tube 1 2 3 4 5
Diholoside
mg
10 10 10 10 10
Tampon
mL pH 4,8
1
pH …afficher plus de contenu…

Mise en évidence du pouvoir réducteur éventuel
La liqueur de Fehling, mélange extemporané des solutions A et B (1:1), est utilisée. Dans un tube à hémolyse, peser environ 10 mg de diholoside, ajouter 0,2 mL de solution A et 0,2 mL de solution B.
Préparer en parallèle un essai à blanc.
Placer les tubes dans le bain-marie à 38 °C pendant 20 à 25 minutes. 4. RESULTATS
Donner le principe de la chromatographie sur couche mince.
A partir du chromatogramme obtenu, donner toutes les structures envisageables pour le diholoside.
Justifier et préciser leurs noms et leurs formules. Déduire de l'action de la liqueur de Fehling la seule structure possible, la dessiner.

VERIFICATION PAR METHODE GRAVIMETRIQUE DES QUALITES
METROLOGIQUES D’UNE MICROPIPETTE A