Travail préliminaire svt

1281 mots 6 pages
Travail préliminaire SAE 3.02 : Étude moléculaire et cellulaire dans un contexte physiopathologique L’objectif de cette SAE est d’évaluer la toxicité d’éthanol sur les cellules CHO. Ainsi on va choisir
10 concentrations d’éthanols pour déterminer la limite de concentration d’éthanol avant que ces cellules ne soient plus viables. Au préalable il est indispensable d’identifier les témoins (positif/négatif) pour valider les futurs résultats que l’on va obtenir.
Le témoins positive au niveau
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La M(éthanol) est égale à 46,06g/mol.
Volume éthanol en µL
On nous indique que la densité de l’éthanol est égale à 0,789g pour 1 ml
Donc il faut appliquer un produit en croix pour déterminer le volume d’éthanol lorsque la masse change c’est-à-dire réaliser le calcul suivant : masse de l’éthanol / 0,789g.
Exemple : cupule 2 => 0,13818/0,789 = 175 µL
On obtient le volume d’éthanol en ml que l’on convertit en microlitre par la suite.
V milieu (mL)
Pour déterminer le volume du milieu il faut faire le calcul suivant :
➔ 5 ml – (volume d’éthanol en ml )
Accompagner les calculs d’un plan de plaque indiquant l’emplacement des différentes
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En effet le MTT ou sel de tétrazolium est réduit par les enzymes présentes au niveau mitochondrial des cellules vivantes (actifs) en NADPH et NADH. On obtient alors la formation du formazan qui se précipite en violet dans la mitochondrie des cellules puis à l’aide d’un spectrophotomètre en mesure la densité optique du produit formazan à 570 nm. Cela permet d’évaluer les cellules viables.
Plusieurs expériences démontrent que la mort cellulaire induite par l’éthanol est l’apoptose.
En effet, l’article nous indique que la toxicité de l’éthanol a un impact sur le réticulum endoplasmique contenant le Bcl-2. Le Bcl-2 protège de l’éthanol mais lorsque que le RE subit un stress c’est-à-dire

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