TRAVAUX PRATIQUES
DE BIOCHIMIE
UNITÉ D'ENSEIGNEMENT LV232
LICENCE DE SCIENCES ET TECHNOLOGIES,
MENTION SCIENCES DU VIVANT

Le port de la blouse est obligatoire

Il est absolument nécessaire de lire au préalable le polycopié du TP concerné y compris et surtout les annexes.
Il est fortement conseillé de préparer à l’avance le compte-rendu qui sera remis à l’enseignant à la fin de chaque séance.
Prévoir du papier millimétré.
Présentation du compte-rendu :
- résumer brièvement le but de la manipulation en une dizaine de lignes (inutile de recopier le polycopié !!! )
- faire ressortir les résultats expérimentaux et surtout leurs critiques.

- ANNÉE 2009 - 2010 -

TP Biochimie LV 232 – Année 2009 - 2010

Table des matières
ANNEXE
(à lire AVANT les TP)
Spectrométrie d’absorption
Utilisation des micropipettes automatiques
3

2–3

TRAVAUX PRATIQUES
Propriétés acido-basiques des aminoacides
Titrage protométrique de l'histidine
Réalisation d'une solution tampon

4
5

Séparation de molécules par chromatographie d'exclusion sur colonne

6-9

Cinétique enzymatique
Bases de cinétique enzymatique
Etude de la β Galactosidase

10 – 11
11 - 13

Modèles moléculaires

14 – 17

Annexes à détacher et à inclure ans le compte rendu :
Tableau cinétique enzymatique
Tableau chromatographie d’exclusion

-1-

TP Biochimie LV 232 – Année 2009 - 2010

ANNEXE
(à lire impérativement avant les TP)

SPECTROMÉTRIE D’ABSORPTION
La spectrométrie d’absorption est une méthode d’analyse dont le principe est le suivant : un faisceau de lumière (photons) de longueur d’onde donnée traverse la solution étudiée.
La mesure de la fraction d’intensité lumineuse absorbée à cette longueur d’onde permet de déterminer la concentration de la substance absorbante.
Le domaine de longueur d’onde utilisable correspond au spectre visible :400 (bleu) à 800 (rouge) nm environ ou au proche ultraviolet (200 à 400 nm).
A) LOI DE LA SPECTROMETRIE
a)