Absorbance

étant la plus grande, l’incertitude sur la mesure sera la plus petite. 3 Mise en œuvre du protocole A 0,25 Solution fille S1 S2 S3 S4 S5 Dakin® Concentration molaire C en mol · L−1 (× 10–4) 1,8 1,4 1,0 0,6 0,2 ? 0,20 0,15 0,10 Absorbance A 0,23 0,173 0,127 0,074 0,025 0,107 0,05 On en déduit : CDakin® ≈ 8,5 × 10−5 mol · L−1. 4 L’absorbance des solutions étudiées est proportion- 0 C (s 10 –4 mol.L–1) 0 0,5 1 1,5 2,0 nelle à leur concentration, car le graphe est une droite

considérée. Ce coefficient dépend de : • la nature de la substance ; • la longueur d'onde de la lumière ; • la nature du solvant ; • la température Lorsque la solution contient plusieurs substances absorbante, Si, chaque substance a une absorbance Ai = εi(λ) (λ . l . ci. L'expérience montre que l'absorbance de la solution est : A(λ λ) =∑ Ai (λ) (λ = ∑ εi(λ) (λ . l . ci Page 16 Claude ANIES  EduKlub S.A. Tous droits de l’auteur des œuvres réservés. Sauf autorisation, la reproduction ainsi

relève sur l’étiquette la mention suivante : phosphore 18 mg.L-1 exprimé en P2 O5 . - Calculer la concentration massique de cette eau, exprimée en mg de phosphore par litre. - Proposer une prise d’essai de cette eau à doser de manière à avoir une absorbance se situant au milieu de la gamme. Données : M(P2 O5 ) = 142 g.mol-1 M(P) = 31 g.mol-1 - Erreurs fréquemment commises : - question 1.2. : mauvaise lecture de la question à l’origine du calcul de la concentration dans le tube et non de la solution

lumière (Io-I) est absorbée par cette solution. La loi de Lambert-Beer relie la fraction de l’intensité absorbée à la concentration de la solution en espèce colorée : [pic] [pic] Dans ces relations : D : densité optique (log Io/I) ou absorbance Io : intensité de la lumière incidente I : intensité de la lumière transmise e : coefficient d’extinction molaire en mol-1.l.cm-1 et e dépend de la nature de la substance et de la longueur d’onde de la lumière C : concentration de l’espèce absorbante

37°C permettant l’association de l’ALAT avec son cofacteur, le phosphate de pyridoxal Ajout du réactif 2 (acide 2-oxoglutarique) pour démarrer la réaction : 100 µL Mesurer la variation d’absorbance à 340 nm à 37°C pdt 1 min Résultats : Temps (s) Absorbance 0 0,925 10 0,905 20 0,885 30 0,865 40 0,845 50 0,825 60 0,805 • • • o Réactif 1 (Tampon + NADH,H+ + L-alanine + LDH + phosphate de pyridoxal) :1 mL o Sérum de Mr X : 100 µL Exercice 5 Le Km de l’enzyme pour son substrat est de 0,30 mM. Pour mesurer

connues et croissantes d’une solution étalon (Ce) de l’atome X à doser. On ajoute la même quantité de réactifs (VR) dans toutes les fioles sans exception en respectant le mode opératoire. On complète avec H2O jusqu’au trait de jauge. On mesure les absorbances A1, A2, A3, A4 …. On trace la courbe A=f(Ci) en tenant compte de l’essai à blanc : Ci est la concentration de l’ajout dans la fiole n° i  (i=1,2,3 …) : Le point d’intersection de la droite obtenue avec l’axe des abscisses est le

moins concentrée. Le but final est d’obtenir pour chaque solution des concentrations dont les absorbances sont toutes situées dans le même intervalle d’AUFS. Les solutions de travail obtenues sont les suivantes : - Naphtalène à 0,9 g/L - Acénaphtylène à 1,5 g/L - Biphényl à 0,2 g/L - Fluorène à 0,3 g/L - Phénantrène à 0,15 g/L. De plus, ces solutions ont toutes une absorbance comprise entre 0,2 et 0,5 d’AUFS. . ➢ Volume mort et porosité  Le volume mort correspond

dans laquelle est placée la solution à analyser (échantillon). Un détecteur permet de mesurer l'intensité lumineuse à la sortie de la cuve. Lumière polychromatique Monochromateur Réseau par réflexion ou prisme Fente C U V E 5) Absorbance d'une solution: a) absorbance d’une solution Détecteur L’absorbance est lié à l'intensité lumineuse du faisceau incident pénétrant dans une cuve contenant le liquide à étudier et à l'intensité lumineuse du faisceau transmis ressortant de cette cuve Flux

potassium est de couleur complémentaire aux radiations absorbées (les vertes) soit violette (magenta). 1.2. Un laser de longueur d'onde 540 nm serait adapté pour cette étude car sa longueur d’onde est dans l’intervalle d’absorbance maximale. 2. Absorbance et cinétique chimique 2.1. D’après l’équation, on constate que la réaction consomme des ions permanganate donc la concentration [MnO4–(aq)](t) diminue. Or Aλ(t) = k. [MnO4–(aq)](t) donc l’absorbance Aλ(t) diminue au cours du temps. 2.2. Soit

spectrométrie » toutefois, les vieilles habitudes ayant la vie dure, il est courant de faire l’amalgame entre ces deux termes. Quoiqu’il en soit, il nous reste à définir le spectre. Il s’agit de la distribution en énergie, puissance, intensité, absorbance, transmission, etc (signal en général) en fonction de la longueur d’onde ou de la fréquence. On distingue 3 types de spectres : - Les spectres continus, pour lesquels il existe un « signal » pour chaque longueur d’onde (ou fréquence). Ex.